[发明专利]一种人工培养粪便菌群移植在肠道疾病治疗中的应用

摘要

一种人工培养粪便菌群移植在肠道疾病治疗中的应用，是收集经过多项条件筛选后的健康人群的粪便，通过匀浆、悬浮、稀释、过滤、离心等步骤收集肠道混合益生菌群；采用平板分离技术，分别在厌氧和需氧的条件下培养，挑选可培养的肠道内的益生菌群；采用胃镜、肠镜、鼻-空肠管、造瘘口、灌肠等途径进行人工培植的肠道菌群的移植，恢复肠道内的菌群平衡，达到治疗肠道疾病的效果。尤其针对腹泻、难辨梭状芽胞杆菌感染、克罗恩病等具有良好的治疗效果。

主权项

一种人工培养粪便菌群移植在肠道疾病治疗中的应用，其特征是:（1）、粪便的采集及筛选条件：采集健康人群的新鲜粪便，封口袋密封保存备用；对粪便采集者筛选条件为：a、常规血液检查正常；b、至少近3‑6个月内没有发生腹泻且没有使用过抗生素；c、无传染性疾病，如HIV、乙肝、丙肝；d、无糖尿病及恶性肿瘤病史；e、没有胃肠道疾病；f、没有胃肠道手术史；g、没有系统自身免疫疾病及其他过敏性疾病；h、没有代谢疾病；i、没有不良性生活嗜好；j、小孩、年轻人、伴侣或者伴侣亲属优先选择；（2）、粪菌的分离和培养：a、取新鲜的健康人群的粪便，加入适量生理盐水，用匀浆机充分悬浮，呈泥浆状；采用过滤器或医用纱布过滤匀浆，去除排泄废弃物，保留混合菌悬液；b、取混合菌悬液涂布于MRS平板、BHI平板、LB平板、LB+5%脱脂乳平板、血平板上，置于厌氧和需氧两种条件下培养，挑选单菌落；c、进行细菌鉴定后，保存分离得到的肠道益生菌；（3）、冻干粉制备：将分离的得到的益生菌二次活化后，采用冻干机制成冻干粉，保留备用；（4）、粪菌颗粒的制备：选择海藻酸钠为主要囊材，以果胶为辅材，胶液总浓度为2％，胶液：粪菌体积比为1：1，海藻酸钠：果胶质量比为2：1，CaCL₂浓度为0.3 moL／L；粪菌颗粒直径为1～2 mm；（5）、粪菌胶囊的制备：粪菌冻干粉或粪菌颗粒包裹于胶囊中，通过口服进入人体肠道；或通过鼻饲、插胃管、消化内镜下喷洒的方式移植从健康人群粪便中分离的粪菌进入肠道，重新恢复肠道菌群的动态平衡，以达到治疗由于肠道菌群失调导致的多种肠道疾病的目的。