[发明专利]细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子1B基因多态分型新技术在审
| 申请号： | 201510618306.8 | 申请日： | 2015-09-24 |
| 公开（公告）号： | CN105296611A | 公开（公告）日： | 2016-02-03 |
| 发明（设计）人： | 张文娟;荆春霞;吴赤蓬;杨光;纪卫东;胡大林;杨淋清;王威 | 申请（专利权）人： | 暨南大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京迎硕知识产权代理事务所(普通合伙) 11512 | 代理人： | 张群峰;吕良 |
| 地址： | 510632 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子1B基因多态分型新技术。该方法包括：提供待测人基因组DNA；提供扩增人CDKN1B基因rs34329位点附近序列的上游引物和下游引物，其中下游引物具有错配碱基G；以所述待测人基因组DNA为模板，利用上游引物和下游引物进行PCR扩增反应以获得含SATTC片段的扩增产物，或含AGSATTC的扩增产物，其中S为人CDKN1B基因rs34329位点上的待定碱基C或G；提供限制性内切酶；利用限制性内切酶对所得扩增产物进行酶切以获得相应的酶切产物；以及根据所得酶切产物来确定人CDKN1B基因rs34329位点上的待定碱基S是C还是G。本发明的测定手段不但快速可靠，而且测定成本大大降低。 | ||
| 搜索关键词： | 细胞周期 蛋白 依赖性 激酶 抑制 因子 基因 多态分型 新技术 | ||
【主权项】：
一种测定人CDKN1B基因rs34329位点多态性的方法，包括：提供待测人基因组DNA；提供扩增人CDKN1B基因rs34329位点附近序列的上游引物和下游引物，其中下游引物具有错配碱基G；以所述待测人基因组DNA为模板，利用上游引物和下游引物进行PCR扩增反应以获得含SATTC片段或AGSATTC片段的扩增产物，其中S为人CDKN1B基因rs34329位点上的待定碱基C或G；提供限制性内切酶；利用限制性内切酶对所得扩增产物进行酶切以获得相应的酶切产物；以及根据所得酶切产物来确定人CDKN1B基因rs34329位点上的待定碱基S是C还是G，其中，限制性内切酶为仅能够切开CATTC片段与GATTC片段之一的限制性内切酶，或为仅能够切开AGCATTC或AGGATTC片段之一的限制性内切酶，在所得扩增产物上，下游引物的错配碱基G与多态位点S的互补碱基之间相隔三个碱基AAT，通过设计上游引物和下游引物的长度而使得扩增产物的总片段长度在100至300bp之间，并且下游引物的片段长度至少为35bp，使得酶切切掉部分片段占总片段的长度的百分比超过20％。
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