[发明专利]一种用于检测食管鳞癌相关血清miRNAs基因的试剂盒

摘要

本发明公开了一种用于检测食管鳞癌相关血清miRNAs基因的试剂盒，属于分子生物学技术领域。本发明的技术方案要点为：一种用于检测食管鳞癌相关血清miRNAs基因的试剂盒，包含有用于诊断食管鳞癌相关血清miRNAs基因的茎环引物与RNase-free水配制的检测试剂。本发明还公开了该用于检测食管鳞癌相关血清miRNAs基因的试剂盒的使用方法。本发明直接采用实时荧光定量聚合酶链式反应（qPCR）技术对血清中多种与食管鳞癌相关血清miRNAs基因进行检测，可通过该方法实现微创早期食管鳞癌的诊断、大规模筛查和预后评估。

主权项

一种用于检测食管鳞癌相关血清miRNAs基因的试剂盒，其特征在于包含有用于诊断食管鳞癌相关血清miRNAs基因的茎环引物与RNase‑free水配制的检测试剂，其中食管鳞癌相关血清miRNAs基因是hsa‑miR‑10a‑5p基因、hsa‑miR‑16‑5p基因、hsa‑miR‑18a‑5p基因、hsa‑miR‑21‑5p基因、hsa‑miR‑22‑3p基因、hsa‑miR‑25‑3p基因、hsa‑miR‑31‑5p基因、hsa‑miR‑100‑5p基因、hsa‑miR‑107基因、hsa‑miR‑127‑3p基因、hsa‑miR‑129‑5p基因、hsa‑miR‑148b‑3p基因、hsa‑miR‑155‑5p基因、hsa‑miR‑194‑5p基因、hsa‑miR‑200c‑3p基因、hsa‑miR‑223‑3p基因、hsa‑miR‑337‑5p基因、hsa‑miR‑375基因、hsa‑miR‑483‑5p基因、hsa‑miR‑548k基因、hsa‑miR‑1246基因或hsa‑miR‑1322基因，用于诊断食管鳞癌相关血清miRNAs基因的茎环引物为以下22种茎环引物中的至少一种：（1）针对hsa‑miR‑10a‑5p基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的茎环引物：5’‑GTCGTATCCATGGCAGGGTCCGAGGTATTCGCCATGGATACGACCACAAA‑3’；（2）针对hsa‑miR‑16‑5p基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示的茎环引物：5’‑GTCGTATCCATGGCAGGGTCCGAGGTATTCGCCATGGATACGACCGCCAAT‑3’；（3）针对hsa‑miR‑18a‑5p基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示的茎环引物：5’‑GTCGTATCCATGGCAGGGTCCGAGGTATTCGCCATGGATACGACCTATCT‑3’；（4）针对hsa‑miR‑21‑5p基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示的茎环引物：5’‑GTCGTATCCATGGCAGGGTCCGAGGTATTCGCCATGGATACGACTCAACA‑3’；（5）针对hsa‑miR‑22‑3p基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示的茎环引物：5’‑GTCGTATCCATGGCAGGGTCCGAGGTATTCGCCATGGATACGACACAGTT‑3’；（6）针对hsa‑miR‑25‑3p基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示的茎环引物：5’‑GTCGTATCCATGGCAGGGTCCGAGGTATTCGCCATGGATACGACTCAGAC‑3’；（7）针对hsa‑miR‑31‑5p基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示的茎环引物：5’‑GTCGTATCCATGGCAGGGTCCGAGGTATTCGCCATGGATACGACAGCTAT‑3’；（8）针对hsa‑miR‑100‑5p基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示的茎环引物：5’‑GTCGTATCCATGGCAGGGTCCGAGGTATTCGCCATGGATACGACCACAAG‑3’；（9）针对hsa‑miR‑107基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示的茎环引物：5’‑GTCGTATCCATGGCAGGGTCCGAGGTATTCGCCATGGATACGACTGATAG‑3’；（10）针对hsa‑miR‑127‑3p基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.10所示的茎环引物：5’‑GTCGTATCCATGGCAGGGTCCGAGGTATTCGCCATGGATACGACAGCCAA‑3’；（11）针对hsa‑miR‑129‑5p基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.11所示的茎环引物：5’‑GTCGTATCCATGGCAGGGTCCGAGGTATTCGCCATGGATACGACGCAAGC‑3’；（12）针对hsa‑miR‑148b‑3p基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.12所示的茎环引物：5’‑GTCGTATCCATGGCAGGGTCCGAGGTATTCGCCATGGATACGACACAAAG‑3’；（13）针对hsa‑miR‑155‑5p基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.13所示的茎环引物：5’‑GTCGTATCCATGGCAGGGTCCGAGGTATTCGCCATGGATACGACACCCCT‑3’；（14）针对hsa‑miR‑194‑5p基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.14所示的茎环引物：5’‑GTCGTATCCATGGCAGGGTCCGAGGTATTCGCCATGGATACGACTCCACA‑3’；（15）针对hsa‑miR‑200c‑3p基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.15所示的茎环引物；5’‑GTCGTATCCATGGCAGGGTCCGAGGTATTCGCCATGGATACGACTCCATC‑3’；（16）针对hsa‑miR‑223‑3p基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.16所示的茎环引物：5’‑GTCGTATCCATGGCAGGGTCCGAGGTATTCGCCATGGATACGACTGGGGT‑3’；（17）针对hsa‑miR‑337‑5p基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.17所示的茎环引物：5’‑GTCGTATCCATGGCAGGGTCCGAGGTATTCGCCATGGATACGACAACTCC‑3’；（18）针对hsa‑miR‑375基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.18所示的茎环引物：5’‑GTCGTATCCATGGCAGGGTCCGAGGTATTCGCCATGGATACGACTCACGC‑3’；（19）针对hsa‑miR‑483‑5p基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.19所示的茎环引物：5’‑GTCGTATCCATGGCAGGGTCCGAGGTATTCGCCATGGATACGACCTCCCT‑3’；（20）针对hsa‑miR‑548k基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.20所示的茎环引物：5’‑GTCGTATCCATGGCAGGGTCCGAGGTATTCGCCATGGATACGACAGCAAA‑3’；（21）针对hsa‑miR‑1246基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.21所示的茎环引物：5’‑GTCGTATCCATGGCAGGGTCCGAGGTATTCGCCATGGATACGACCCTGCT‑3’；（22）针对hsa‑miR‑1322基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.22所示的茎环引物：5’‑GTCGTATCCATGGCAGGGTCCGAGGTATTCGCCATGGATACGACCAGCAT‑3’。