[发明专利]一种北虫草液体菌种稳定技术

摘要

本发明公开了一种北虫草液体菌种稳定技术，包括由取玉米芯60～110份，木屑30～40份、葡萄糖11～15份，蛋白胨3～5份，琼脂7～13份，松针营养液90～196份、硫酸镁0.3～0.7份、磷酸二氢钾0.3～0.7份、氨基酸螯合锰0.2～0.3份、一水硫酸锌0.2～0.3份混合所得的扩种培养基培育步骤；由麦芽糖，蛋白胨，MnSO4粉末、CuSO₄粉末、ZnSO4粉末、NiSO4粉末、(NH4)6Mo7O24.4H2O粉末混合所得的固体培养基培育步骤；以及由马铃薯渣、红薯藤、酵母膏、蛋氨酸锰和硒蛋氨酸混合所得培养基的培养步骤。本发明所制备的产品虫草素含量不低于0.2％，而且含量稳定。

主权项

一种北虫草液体菌种稳定技术，其特征在于，包括如下步骤：S1、取玉米芯60～110份，木屑30～40份、葡萄糖11～15份，蛋白胨3～5份，琼脂7～13份，松针营养液90～196份、硫酸镁0.3～0.7份、磷酸二氢钾0.3～0.7份、氨基酸螯合锰0.2～0.3份、一水硫酸锌0.2～0.3份混合后装入三角瓶中，经灭菌、冷却、摆成斜面，接种虫草的菌丝体，在20℃～25℃的培养箱中，避光培养3～4天，降温至20℃培养4～5天，然后在18～22℃自然光照24小时；S2、按组分含量称取MnSO₄粉末0.1～0.4g/L、CuSO₄粉末0.02～0.1g/L、ZnSO₄粉末0.1～0.2g/L、NiSO₄粉末0.2～0.4g/L、(NH₄)₆Mo₇O₂₄.4H₂O粉末0.2～0.4g/L，混合后，灭菌，按体积比为该液体培养基的50～60％的量，接种步骤S1所得的菌丝体，在20～24℃，180r/min的旋转式摇床上液态培养1～1.5d，得培养液；S3、取马铃薯渣260～400份、红薯藤520～800份完全浸湿，搅拌均匀后，取5～11份混合菌液稀释2～5倍后喷入原料中并混匀；同时按1.3～2.2L/m³用量的比例将过氧化尿素喷洒到原料上翻拌混合均匀，此后每周喷施1次混合菌液，翻拌均匀形成稳定菌落体，连续接种4～5周后使原料进入分解阶段，停止分解菌接种，再每隔5天翻拌1次原料，持续4～5周，保持原料堆内的有氧条件，原料堆内湿度保持在70％～80％；S4、发酵结束后装入食用菌袋，每袋折装干料400～600克，松紧要适度，用细绳扎紧两端袋口，常压下先将温度升至100～105℃，保温20～25min；然后将温度上升至110～115℃，保温60～70min；再将温度升至120～125℃，在压力为0.13～0.14MPa的情况下保温60～70min，最后再闷置30～35min，停止加热，让其自然冷却到24℃以下，加入酵母膏9～15份、蛋氨酸锰2～3份、硒蛋氨酸2～3份混合均匀后装瓶，无菌条件下接种步骤S2所得的培养液，放入培养暗室18～23℃避光培养直至培养基表面长出白色菌丝时，采用钴‑60γ射线处理后，揭开瓶盖将栽培瓶侧放进行培育，白天房间温度保持在15～22℃，昼夜温差控制在5～8℃，每天给予500～1000lx散射光，当子座长齐、尖端膨大、孢子形成时即可采收。