[发明专利]一种番鸭细小病毒VP3基因重组鸡痘病毒转移载体及其构建方法有效
| 申请号： | 201510570155.3 | 申请日： | 2015-09-09 |
| 公开（公告）号： | CN105132462B | 公开（公告）日： | 2019-03-26 |
| 发明（设计）人： | 李林林;胡奇林;孙敏华;董嘉文;袁建丰;邝瑞欢;张建峰 | 申请（专利权）人： | 广东省农业科学院动物卫生研究所 |
| 主分类号： | C12N15/863 | 分类号： | C12N15/863 |
| 代理公司： | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人： | 胡辉 |
| 地址： | 510640 广东省广州市天*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种番鸭细小病毒VP3基因重组鸡痘病毒转移载体及其构建方法。以鸡痘病毒基因组为模板扩增TK基因的同源重组臂TKL、TKR，并将其连接成带有多克隆位点MCS的TK片段，再连入骨架质粒，得质粒pTK；合成反向串联表达盒S，并将其插入质粒pTK中，得质粒pTKS；在早期启动子P7.5后的MCS1处插入VP3基因，晚期启动子P11后的MCS2处插入EGFP BGH pA，即得目的转移载体pTKS‑VP3‑EGFP。将pTKS‑VP3‑EGFP转染鸡痘病毒感染的鸡胚成纤维细胞后，经RT‑PCR和荧光蛋白检测VP3能够正常表达。本发明为进一步研制安全、高效的MDPV重组鸡痘病毒疫苗奠定了基础。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 细小 病毒 vp3 基因 重组 痘病毒 转移 载体 及其 构建 方法 | ||
【主权项】：
1.一种番鸭细小病毒VP3基因重组鸡痘病毒转移载体，其特征在于：该转移载体为在pBluescript II SK(+)骨架中插入了如SEQ ID NO:15所示的核苷酸序列，该序列插入在pBluescript II SK(+)骨架中KpnI、SacI的两个酶切位点间，该转移载体中包含如SEQ ID NO：3所示的TK片段。
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