[发明专利]月桂酸修饰超氧化物歧化酶的制备方法

摘要

本发明公开了一种月桂酸修饰超氧化物歧化酶的制备方法，包括以月桂酸和氯化亚砜为原料在吡啶DMF催化下反应得到月桂酰氯；在40～48℃的碱性条件下，用月桂酰氯与超氧化物歧化酶进行酰基化反应；对酰基化反应物过滤后取上清液Ⅰ通过3～6级的温度梯度处理，初始温度为40～45℃，每级温差为5～10℃，末级处理的低温为5～10℃，每级处理降温后恢复至上级处理的降温温度，取温度梯度处理后的上清液进行2级沉淀灭菌提纯处理得到月桂酸修饰超氧化物歧化酶。该方法获得月桂酸修饰的超氧化物歧化酶的活性和收率均较高，并且工艺简单、周期短。

主权项

一种月桂酸修饰超氧化物歧化酶的制备方法，其特征在于：包括以下步骤，以月桂酸和氯化亚砜为原料，以吡啶DMF为催化剂进行催化反应得到月桂酰氯；在40～48℃的碱性条件下，用月桂酰氯与超氧化物歧化酶进行酰基化反应；对酰基化反应物过滤后取上清液Ⅰ通过3～6级的温度梯度处理，所述3～6级的温度梯度处理为初始温度为40～45℃，每级温差为5～10℃，末级处理的低温为5～10℃，其中首级温度梯度处理是将上清液Ⅰ由初始温度迅速冷却至初始温度减去每级温差后的低温，并保持10～15分钟后迅速升温至初始温度进行3500～4500转/分钟离心10～30分钟，除去沉淀取上清液，后续每级温度梯度处理是将前一级上清液由前一级处理后温度迅速冷却至前一级处理后温度减去每级温差后的低温，并保持10～15分钟后迅速升温至前一级处理的低温进行3500～4500转/分钟离心10～30分钟，除去沉淀取上清液，对末级处理后的上清液Ⅱ进行2级沉淀灭菌提纯处理得到月桂酸修饰超氧化物歧化酶。