[发明专利]绵羊依诺肝素钠化合物的制备方法及其化合物与应用

摘要

本发明揭示了一种以绵羊肠粘膜肝素制备绵羊依诺肝素钠的方法，步骤包括：1）绵羊肝素的预处理；2）绵羊肝素季铵盐的制备；3）绵羊肝素苄酯的制备；4）对绵羊肝素苄酯进行碱解聚、脱色、以酸中和、醇沉淀，精制、干燥，得到绵羊依诺肝素钠成品。本发明筛选和确立了以绵羊肠粘膜肝素制备绵羊依诺肝素钠的简单高效方法，并对制备出的绵羊依诺肝素钠进行了系统的理化性质、生物学活性和分子结构研究。本发明所制备的绵羊依诺肝素钠完全符合USP37和EP8.0依诺肝素钠的质量放行标准，具有极高的实用价值和医疗应用前景。绵羊肝素钠，原料简便易得，质量可控，没有疯牛病病毒风险的存在，还可以促进绵羊养殖和屠宰废料（肠粘膜）的有效利用，经济潜力巨大。

主权项

绵羊依诺肝素钠化合物的制备方法，其特征在于：包括如下步骤，S1、原料绵羊肠粘膜肝素的预处理，将绵羊肠粘膜肝素钠溶解于浓度为1%‑3%的氯化钠水溶液中形成绵羊肠粘膜肝素溶液，对所述绵羊肠粘膜肝素溶液进行精过滤，再在室温下进行醇沉精制，收集沉淀物，干燥获得绵羊肠粘膜肝素，直至所述绵羊肠粘膜肝素的水溶液澄清且色度不深于5号标准色，绵羊血浆法抗凝活性折干后不少于130单位每毫克，硫酸皮肤素的含量不高于1%；S2、绵羊肠粘膜肝素季铵盐的制备，将S1中获得的绵羊肠粘膜肝素钠溶解配制成绵羊肠粘膜肝素水溶液，并与苄索氯铵水溶液进行混合，过滤或离心获得绵羊肠粘膜肝素季铵盐，并进行洗涤干燥；S3、绵羊肠粘膜肝素苄酯的制备，将S2中干燥得到的绵羊肠粘膜肝素季铵盐与二氯甲烷及氯化苄按重量比例混合酯化，酯化温度为30℃‑40℃，所述绵羊肠粘膜肝素季铵盐：二氯甲烷：氯化苄为1:3‑10:1‑2；在酯化后的绵羊肠粘膜肝素季铵盐中滴加醋酸钠甲醇溶液，制得绵羊肠粘膜肝素苄基酯沉淀，将绵羊肠粘膜肝素苄基酯沉淀进行过滤、洗涤、干燥，制得绵羊肠粘膜肝素苄基酯，所述绵羊肠粘膜肝素苄基酯折干后的酯化度不小于9.5%；S4、绵羊依诺肝素钠成品制得，将S3中的绵羊肠粘膜肝素苄基酯进行碱解聚、脱色、以酸中和至中性、醇沉淀，精制、干燥，得到绵羊依诺肝素钠成品，所述绵羊依诺肝素钠成品重均分子量在3800‑5000之间，其中分子量<2000部分的比例在12.0%‑20.0%之间，2000<分子量<8000部分的比例在68.0%‑82.0%之间，分子量>8000部分的比例不超过18.0%；1,6‑酐含量在15%‑25%之间；抗Ⅹa活性折干后在90‑125单位每毫克之间，抗Ⅱa活性折干后在20‑35单位每毫克之间，抗Ⅹa/抗Ⅱa比例在3.3‑5.3之间。