[发明专利]一种基于单链DNA核酸适配体修饰有机/无机杂化石英毛细管整体柱的制备方法

摘要

本发明公开了一种基于单链DNA核酸适配体修饰有机/无机杂化石英毛细管整体柱的制备方法，按以下步骤依次进行(1)对空心石英毛细管内表面进行活化处理；(2)称CTAB于离心管中，分别加入TEOS、APTES、无水乙醇等经过多步处理得到有机/无机杂化整体柱；(3)先后用甲醇和纯净水冲洗；(4)活化，室温反应一段时间，采用PBS缓冲液反复冲洗；(5)将所述赭曲霉素A适配体溶液注入有机/无机杂化整体柱，室温下循环反应低温保存，既得。该产品用于复杂生物样品及食品中痕量、超痕量的赭曲霉素、黄曲霉素等物质的高选择性分离与富集。

主权项

一种基于单链DNA核酸适配体修饰有机/无机杂化石英毛细管整体柱的制备方法，按以下步骤依次进行：(1)采用食人鱼碱对空心石英毛细管的内表面进行加热冲洗，活化其内表面硅羟基；(2)称量十六烷基三甲基溴化铵于离心管中，分别加入正硅酸乙酯、3‑氨丙基三乙氧基硅烷、无水乙醇及水，混匀，将所述混匀液注入所述步骤(1)所得的空心石英毛细管后，硅胶片封端，恒温反应，将其取出进行干燥老化，制备得到有机/无机杂化整体柱；(3)将上述有机/无机杂化整体柱连接至高压泵，分别用甲醇、水冲洗；(4)取链霉亲和素溶液，加入磷酸缓冲液，混匀后注入步骤(3)所得的有机/无机杂化整体柱，偶联链霉亲和素，室温反应后，取出所述有机/无机杂化整体柱，用磷酸缓冲液冲洗，再采用Tris‑HCl缓冲液活化整体柱内链霉亲和素；(5)取赭曲霉素A核酸适配体溶液，将其注入步骤(4)所得的有机/无机杂化整体柱，室温反应后，采用Tris‑HCl缓冲液清洗，低温保存；其中，步骤(4)中，取200μL浓度为1mg/mL的链霉亲和素溶液，加入800μL的pH为6.0‑7.0、浓度为10mmol/L的磷酸缓冲液以及1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐/N‑羟基琥珀酰亚胺的混合液，混匀后，以20μL/min流速注入步骤(3)中所得的有机/无机杂化整体柱；步骤(5)中，取1400μL浓度为0.5μmol/L的赭曲霉素A适配体溶液，以10μL/min流速循环注入步骤(4)所得的有机/无机杂化整体柱。