[发明专利]一种治疗艾滋病的中药唐草片新增检测成分的测定方法

摘要

本发明提供了一种治疗艾滋病的中药唐草片新增检测成分的测定方法。本发明新增检测成分的测定方法为：(1)采用薄层层析法鉴别唐草片中白花蛇舌草，诃子成分。(2)采用在同一个高效液相色谱法条件下，通过流动相的梯度洗脱，将没食子酸、绿原酸、甘草苷、胡黄连苷Ⅱ同时进行测定。每片唐草片含没食子酸不低于0.9mg、绿原酸不低于0.5mg、甘草苷不低于0.25mg、胡黄连苷Ⅱ不低于0.45mg。本发明通过全检项目确证，说明本发明新增检测项目可以加入原检测方法，进一步提高药品的检测品种和方法，有利于中药唐草片的批量生产测定有利于提高产品质量。本发明测定方法稳定可靠、专一性强，有较大的应用价值。

主权项

1.一种治疗艾滋病的中药唐草片新增检测成分的测定方法，其特征在于，所述新增检测成分的测定方法包括下列步骤：(一)薄层层析色谱法鉴别：(1)、白花蛇舌草鉴别：取中药唐草片样品，研细，加水10‑60ml直接溶解，离心取上清液；或加乙醇10‑60ml超声或回流，滤液蒸干，残渣加水5‑50ml溶解；加入乙酸乙酯或三氯甲烷或正丁醇5‑50ml，萃取1至2次，收集溶剂层，100℃水浴上蒸干，残渣加1‑5ml乙酸乙酯或无水乙醇或甲醇溶解作为供试品溶液；另取白花蛇舌草对照药材适量，加水20ml，加热回流1.5小时，过滤，滤液加水至50ml，再加入乙酸乙酯或三氯甲烷或正丁醇同供试品操作，制成对照药材溶液，照薄层色谱法中国药典2010年版一部VIB试验，吸取上述两种溶液各5‑10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷‑三氯甲烷‑乙酸乙酯‑冰醋酸10:2.5:4:0.25或石油醚‑苯‑乙酸乙酯‑冰醋酸5:10:3.5:0.25为展开剂，展开，取出，晾干，氨蒸气中熏至斑点显色清晰，置日光下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置，显相同颜色的主斑点；(2)、诃子鉴别：取诃子对照药材1g，加水20ml，加热回流1.5小时，过滤，滤液加水至50ml，再加入乙酸乙酯或三氯甲烷或正丁醇5‑50ml后，同上述步骤(1)白花蛇舌草鉴别项下供试品操作，制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取对照药材溶液和上述步骤(1)白花蛇舌草鉴别项下的供试品溶液各5‑10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷‑冰醋酸‑水15:5:0.5下层或甲苯‑冰醋酸‑水15:5:0.5下层为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇显色，在105℃加热至斑点清晰，取出置室温25±2℃冷却半小时，置日光下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置，显相同颜色的斑点；(二)高效液相色谱法测定：取唐草片样品适量，研细，取0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加50％以上甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理30分钟，取出，放至室温25±2℃，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，为供试品溶液，以没食子酸、绿原酸、甘草苷、胡黄连苷Ⅱ制备对照品溶液，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相以有机溶剂和水，加入酸梯度洗脱，所述流动相选自乙腈‑水‑磷酸6‑17:94‑83:0.3或甲醇‑水‑磷酸20‑40:80‑60:0.3，检测波长为263nm‑293nm，精密吸取对照品溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪，照高效液相色谱法中国药典2010年版一部附录VID测定；每片唐草片含没食子酸不低于0.9mg、绿原酸不低于0.5mg、甘草苷不低于0.25mg、胡黄连苷Ⅱ不低于0.45mg。