[发明专利]一种确定样品中砷浓度的方法有效
| 申请号： | 201510482759.2 | 申请日： | 2015-08-06 |
| 公开（公告）号： | CN105018626B | 公开（公告）日： | 2018-12-25 |
| 发明（设计）人： | 王立梅;朱颖越;蔡义林 | 申请（专利权）人： | 常熟理工学院 |
| 主分类号： | C12Q1/6851 | 分类号： | C12Q1/6851 |
| 代理公司： | 江苏致邦律师事务所 32230 | 代理人： | 徐蓓 |
| 地址： | 215500 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种确定样品中砷浓度的方法，包括：（1）PCR管壁上吸附上链霉亲和素；（2）能够特异性识别砷离子的核酸适配体的5’端进行生物素化修饰，在生物素和链霉亲和素的结合作用下，核酸适配体吸附在PCR管壁上；（3）核酸适配体与互补DNA片段结合；（4）待测样品中的砷离子与核酸适配体结合，导致互补DNA片段与PCR管壁分离；（5）用缓冲液将分离的互补DNA片段冲洗掉；（6）荧光定量PCR，通过检测体系中的Ct值确定砷离子的浓度。本发明设计了一种砷离子生物传感器，用以实现水中砷离子的简单、快速、高灵敏检测。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 确定 样品 浓度 方法 | ||
【主权项】：
1.一种确定样品中砷浓度的方法，其特征在于，包括：（1）PCR管壁上吸附上链霉亲和素；（2）能够特异性识别砷离子的核酸适配体的5’端进行生物素化修饰，在生物素和链霉亲和素的结合作用下，核酸适配体吸附在PCR管壁上；所述的核酸适配体和互补DNA的核苷酸序列分别如SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示；（3）核酸适配体与互补DNA片段结合；（4）待测样品中的砷离子与核酸适配体结合，导致互补DNA片段与PCR管壁分离；其中，砷离子的浓度为0.5‑10nM；（5）用缓冲液将分离的互补DNA片段冲洗掉；（6）荧光定量PCR，通过检测体系中的Ct值确定砷离子的浓度，荧光定量PCR的引物序列分别如SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4所示；基于下列线性方程，确定所述样品中砷离子的浓度：y=1.04x+7.01，y为不同砷离子浓度下扩增曲线的循环数，x为相应砷离子的浓度。
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