[发明专利]一种经微生物发酵定向转化制备表儿茶素（EC）单体的方法

摘要

本发明公开了一种经微生物发酵定向转化制备表儿茶素(EC)单体的方法，主要包括如下步骤：（１）利用微生物液体深层发酵将绿茶提取物中的表儿茶素没食子酸酯（ECG）转化为表没食子儿茶素（EC）；（２）将上述表儿茶素（EC）粗品经反相填料层析色谱分离纯化，得到高含量表儿茶素（EC>90%）产品；（３）用5~6倍量（w/v）20%乙醇溶解，4℃放置结晶，待晶体充分生长，脱除母液，4℃冷水洗涤晶体至洗涤液无色，将得到的晶体冷冻干燥，得白色或类白色固体，即为表儿茶素（EC）单体。本发明方法简便，制备周期短，成本低，符合环保和安全的要求，适宜大规模工业化生产。

主权项

一种经微生物发酵定向转化制备表儿茶素(EC)单体的方法，主要包括如下步骤：（１）利用微生物液体深层发酵将绿茶提取物中的表儿茶素没食子酸酯（ECG）转化为表没食子儿茶素（EC）：加入纯水溶解绿茶提取物茶多酚，配置成浓度为1%（w/v）的溶液，调节pH=6.0，料液经高温瞬时灭菌后，注入发酵罐，保持温度32+1℃并接种菌株，，搅拌发酵培养60‑80小时；发酵液经高温瞬时灭活后，离心过滤，取澄清液浓缩至20%（w/v）浓度后，喷雾干燥，产品即为表儿茶素（EC）粗品；（２）将上述表儿茶素（EC）粗品经反相填料层析色谱分离纯化：加入纯水溶解EC粗品配置成浓度为10%（w/v）的上柱料液，反相聚合物填料柱层析分离纯化，反渗透膜浓缩解吸馏分，喷雾干燥得到高含量表儿茶素（EC >90%）产品；（３）将上述高含量表儿茶素（EC >90%）产品用5~6倍量（w/v）20%乙醇溶解，4℃放置结晶，待晶体充分生长，脱除母液，4℃冷水洗涤晶体至洗涤液无色，将得到的晶体冷冻干燥，得白色或类白色固体，即为表儿茶素（EC）单体（>98%）。