[发明专利]一种适用于高通量测序的样品中微生物DNA提取方法在审
| 申请号： | 201510419850.X | 申请日： | 2015-07-16 |
| 公开（公告）号： | CN105176970A | 公开（公告）日： | 2015-12-23 |
| 发明（设计）人： | 郑洪坤;刘慧;刘少卿;何超 | 申请（专利权）人： | 北京百迈客生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12Q1/68;C40B50/06 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 王文君 |
| 地址： | 101300 北京市顺*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种适用于高通量测序的样品中微生物DNA提取方法，属于基因组DNA提取技术领域。本发明采用SDS法提取样品微生物DNA，经过氯化钠溶液、硫酸铝铵溶液沉淀去除抑制物后取上清，再经过硅胶膜柱分离纯化获得适用于高通量测序的土壤微生物基因组DNA；该硫酸铝铵溶液由50-200mM的Al2(SO4)3和50-200mM的(NH4)2SO4按照体积比1:1配制得到。本发明方法提取的样品微生物基因组DNA纯度高、通用性好、提取速度快，可直接用于下游高通量测序实验，具有良好的应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 适用于 通量 样品 微生物 dna 提取 方法 | ||
【主权项】：
一种适用于高通量测序的样品中微生物DNA提取方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)按照样品与裂解缓冲液的质量体积比例200‑1000mg:1‑1.5mL将二者混合，振荡10‑20min；(2)加入SDS溶液和蛋白酶K溶液，充分混匀，55‑65℃水浴8‑15min；离心取上清，加入NaCl溶液，混匀，4℃冰浴沉淀后，再次离心；(3)取上清液，加入硫酸铝铵溶液，混匀，4℃冰浴沉淀后，再次离心；(4)取上清液，过DNA纯化柱纯化。
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