[发明专利]一种利用龙脑樟段木培育牛樟芝子实体的方法

摘要

本发明提供一种利用龙脑樟段木培育牛樟芝子实体的方法，该方法以大小为5×10×20cm的龙脑樟段木为基质，经水浸泡处理，高温灭菌，接种牛樟芝菌种进行培养。本发明具有产量高、周期短、功效成分与野生牛樟芝一致、原料来源丰富稳定等特点，其三萜总量不少于80mg/100g，总多糖不少于50mg/100g；实现了牛樟芝宿主范围的扩大，既有利于对资源稀少的牛樟树的保护，又促进了牛樟芝产业的发展，能带来良好的生态效应、社会效应及经济效应。

主权项

一种利用龙脑樟段木培育牛樟芝子实体的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：（1）将牛樟芝菌种接种到斜面培养基中，于20‑30℃培养10‑30d，制得斜面菌种；所述斜面培养基为：龙脑樟提取液10‑20mL/L，蔗糖10‑30g/L，MgSO4·7H2O 0.5‑2g/L，K2HPO4·3H2O 1‑5g/L，维生素B1 5‑10mg/L，琼脂15‑20g/L，用马铃薯提取液补足体积至1L，pH为6.0‑7.0；其中，所述龙脑樟提取液为：龙脑樟木料粉碎，过40目筛，得龙脑樟木料粉，按照龙脑樟木料粉和水的质量比1:200加水，常压煮沸2小时，过滤得龙脑樟提取液；所述马铃薯提取液为：马铃薯100‑300g去皮切块，得马铃薯块，按照马铃薯块和水的质量比1‑3: 10加水，常压煮沸30min，过滤得马铃薯提取液；（2）用无菌水冲洗步骤（1）制得的斜面菌种的孢子，制成孢子悬液，并用无菌水将孢子悬液的OD600调整为1.5；（3）将步骤（2）制成的孢子悬液按体积比为5%‑10%的比例接种到液体菌种培养基，于25‑35℃、100‑200r/min条件下，避光培养5‑25d，制得液体菌种；所述液体菌种培养基为：龙脑樟提取液 10‑20mL/L，蔗糖10‑30g/L，MgSO4·7H2O 0.5‑2g/L，K2HPO4·3H2O 1‑5g/L，维生素B1 5‑10mg/L，用马铃薯提取液补足体积至1L，pH为6.0‑7.0；（4）将龙脑樟木料分解成5×10×20cm的段木，用水浸泡12‑48h，然后121℃灭菌20‑60min；冷却后，将步骤（3）制得的液体菌种接种到龙脑樟段木上；（5）于25‑35℃、湿度70%‑90%条件下，避光培养1‑12个月；（6）铲掉龙脑樟段木表面的牛樟芝菌丝体形成的菌皮，于20‑40℃、湿度70%‑90%，避光培养12‑36个月，即可得到牛樟芝子实体。