[发明专利]双重实时荧光定量PCR检测引发心内膜炎的巴尔通体的试剂盒

摘要

本发明提供了一种双重实时荧光定量PCR检测引发心内膜炎的巴尔通体的方法，所述方法是利用特异性的引物组及配合使用的探针，对引发心内膜炎的五日热巴尔通体和汉赛巴尔通体进行TaqMan实时荧光定量PCR检测。所述引物组的引物如SEQ ID No.1～4所示，所述配合使用的探针如SEQ ID No.5～6所示。本发明建立的双重实时荧光定量PCR探针法特异性强、灵敏度高、稳定性好。特异性实验结果显示只有五日热巴尔通体和汉赛巴尔通体扩增出荧光信号，其他种属的细菌均未见荧光信号。

主权项

用于检测引发心内膜炎的巴尔通体的实时荧光定量PCR试剂盒，其特征在于，含有引物组及与引物组配合使用的探针；所述引物组包括用于检测汉赛巴尔通体的引物对I和用于检测五日热巴尔通体的引物对II；所述引物对I为：BhF：5’‑GAGTCAGATGGAATGGTATTGGTTATC‑3’；BhR：5’‑CGGTTTATCCCCCACAAGATAGG‑3’；所述引物对II为：BqF：5’‑TGCCAAGTATGCGAGTTCCTG‑3’；BqR：5’‑TCAGAGTTAGGTGCAAGTTCTATGG‑3’；所述探针为：探针I：BhT：FAM‑CCCTCCCGGTTTTTCTCTGGGCCT‑BHQ1；探针II：BqT：CY5‑TCTGCGCCCGGTTCTGAAATGCCT‑BHQ2；其中，FAM和CY5为荧光报告基团，BHQ1和BHQ2为荧光淬灭基因；其中，探针的工作浓度为200nmol /L，引物的工作浓度为300nmol /L。