[发明专利]cPASA用于检测棉蚜种群等位基因突变频率的方法在审
| 申请号： | 201510313713.8 | 申请日： | 2015-06-10 |
| 公开（公告）号： | CN106244673A | 公开（公告）日： | 2016-12-21 |
| 发明（设计）人： | 张靖;芮昌辉;崔丽;徐希宝;任龙;齐浩亮 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院植物保护研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 100193 北京市海淀区圆明园西*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 一种用于棉蚜nAChR beta1等位基因突变频率检测的cPASA方法，特异性cPASA引物设计时，下游引物3’端固定于突变位点处，与242位点的碱基配对或错配。本发明通过改进在特异性引物的外侧设计一条竞争性下游引物，使其适用于突变位点G/C的检测。对棉蚜种群等位基因突变频率的检测，本发明的方法可靠，稳定性高、周期短、灵敏度高、操作简便易行，实验费用低廉。 | ||
| 搜索关键词： | cpasa 用于 检测 棉蚜 种群 等位基因 突变频率 方法 | ||
【主权项】：
一种用于棉蚜等位基因点突变检测的竞争性等位特异性PCR方法(cPASA)，依次包括特异性引物设计、普通PCR扩增、琼脂糖凝胶电泳、根据阳性反应确定等位基因是否突变的步骤，其特征在于：所述特异性cPASA引物设计中，两条特异性下游引物3’端设计于突变位点处，共用一条上游引物，仅仅通过引物3’端G/C的错配，PCR扩增效率是一样的，区分不出突变和未突变，因此，在特异性引物的外侧再加入一条竞争性下游引物，使错配的引物扩增水平降低。
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