[发明专利]一种混合酶酶解制备鱿鱼肝脏蛋白ACE抑制肽的方法

摘要

本发明公开了一种混合酶酶解制备鱿鱼肝脏蛋白ACE抑制肽的方法，包括鱿鱼肝脏预处理后对鱿鱼肝脏蛋白进行脱脂处理，然后采用由复合蛋白酶、中性蛋白酶以及木瓜蛋白酶组成的混合酶水解，再进行离心和冷冻干燥制得鱿鱼肝脏蛋白ACE抑制肽，作为优选，本发明采用保加利亚乳杆菌和瑞士乳杆菌对酶解液进行脱腥处理。本发明采用混合酶酶解制得的鱿鱼肝脏蛋白ACE抑制肽，ACE抑制效果好，采用混合菌种对酶解液进行脱腥处理，有效改善了鱿鱼肝脏蛋白抑制肽的腥味，提高了其感官价值，本发明有效解决了当前鱿鱼肝脏加工利用率低造成鱿鱼资源浪费的问题。

主权项

一种混合酶酶解制备鱿鱼肝脏蛋白ACE抑制肽的方法，其特征在于包括以下步骤：(1)鱿鱼肝脏预处理：将鱿鱼肝脏绞碎与水按质量比1:1～1:1.5混合，在35～50℃下加入6mol/L的氢氧化钠溶液调节pH至7～9，保温20～30min，然后升温至70～90℃，反应1～1.5h，加入占肝脏重量2～4％的氯化钠，盐析5～15min，以4000～10000r/min离心15～30min，去掉上层鱼油，得到粗制的鱿鱼肝脏蛋白；(2)鱿鱼肝脏蛋白脱脂：将粗制的鱿鱼肝脏蛋白脱水后，按料液比1g:3mL加入正己烷和异丙醇的混合液洗涤2～3次，真空干燥得到脱脂鱿鱼肝脏蛋白；(3)混合酶酶解：将脱脂鱿鱼肝脏蛋白配成质量分数为3～5％的水溶液，调节pH6.5～7.5，加入占脱脂鱿鱼肝脏蛋白质量1～6％的混合蛋白酶，在40～65℃的水浴锅中水解10～18h，所述的混合蛋白酶由复合蛋白酶、中性蛋白酶和木瓜蛋白酶组成；(4)酶灭活：酶解结束后，以100℃水浴加热10～20min，使酶失活；(5)离心：失活的酶解液在4000～10000r/min条件下离心20～40min，取上清液，冷冻干燥，冻干的粉末即为鱿鱼肝脏蛋白ACE抑制肽。