[发明专利]半乳糖衍生物阳离子脂质体纳米颗粒的制备方法

摘要

本发明公开了半乳糖衍生物阳离子脂质体纳米颗粒的制备方法。以半乳糖为原料，经全乙酰化、脱1‑O‑乙酰基、三氯乙酰亚胺酯化、糖苷化、叠氮化、脱全部乙酰基反应得中间体，再分别通过3,4‑O‑异丙叉基化、醚化、脱叉基、还原胺化、季铵盐化和还原氨化、叔胺化、季铵盐化反应，合成了两个系列不同物理结构的半乳糖衍生物阳离子脂质体；经水分散后得到相应阳离子脂质体纳米颗，其具有稳定性好、粒径及表面电荷适中、制备成本低等优点，能满足核酸药物转运载体应具备的基本要求。

主权项

1.一系列半乳糖衍生物阳离子脂质体纳米颗粒的制备方法，其特征在于该制备方法包括如下步骤：(1)以半乳糖为原料，高氯酸为催化剂，乙酸酐为反应溶剂及酰化试剂，进行乙酰化反应，经相应的分离纯化处理得到白色固体1,2,3,4,6‑五‑O‑乙酰基‑α,β‑D‑吡喃半乳糖；(2)以1,4‑二氧六环和甲醇为混合溶剂，1,2,3,4,6‑五‑O‑乙酰基‑α,β‑D‑吡喃半乳糖与氨气发生反应，选择性脱1位乙酰基，经相应的分离纯化处理得到淡黄色浆状物2,3,4,6‑四‑O‑乙酰基‑α,β‑D‑吡喃半乳糖；(3)以无水二氯甲烷为反应溶剂，无水碳酸钾提供弱碱性环境，2,3,4,6‑四‑O‑乙酰基‑α,β‑D‑吡喃半乳糖与三氯乙腈发生施密特反应，经相应的分离纯化处理得到白色固体2,3,4,6‑四‑O‑乙酰基‑α‑D‑吡喃半乳糖三氯乙酰亚胺酯；(4)将步骤(3)得到的白色固体化合物2,3,4,6‑四‑O‑乙酰基‑α‑D‑吡喃半乳糖三氯乙酰亚胺酯与3‑氯‑1‑丙醇发生糖苷化反应，经相应的分离纯化处理得到无色浆状物3’‑氯丙基2,3,4,6‑四‑O‑乙酰基‑β‑D‑吡喃半乳糖苷；(5)以N,N‑二甲基甲酰胺为反应溶剂，3’‑氯丙基2,3,4,6‑四‑O‑乙酰基‑β‑D‑吡喃半乳糖苷与叠氮化钠反应，经相应的分离纯化处理得到无色浆状物3’‑叠氮基丙基2,3,4,6‑四‑O‑乙酰基‑β‑D‑吡喃半乳糖苷；(6)以甲醇为反应溶剂，3’‑叠氮基丙基2,3,4,6‑四‑O‑乙酰基‑β‑D‑吡喃半乳糖苷与氨气发生反应脱全部乙酰基，经相应的分离纯化处理得到无色浆状物3’‑叠氮基丙基β‑D‑吡喃半乳糖苷；(7)以浓硫酸为催化剂，以无水硫酸铜为干燥剂，以丙酮为反应溶剂和反应试剂，与步骤(6)得到的3’‑叠氮基丙基β‑D‑吡喃半乳糖苷反应，经相应的分离纯化处理得到白色固体3’‑叠氮基丙基3,4‑O‑异丙叉基‑β‑D‑吡喃半乳糖苷；(8)以N,N‑二甲基甲酰胺为反应溶剂，氢化钠为催化剂，3’‑叠氮基丙基3,4‑O‑异丙叉基‑β‑D‑吡喃半乳糖苷分别与月桂基溴、肉豆寇基溴、鲸蜡基溴、硬脂基溴发生威廉姆逊醚化反应，经相应的分离纯化处理分别得到无色浆状物3’‑叠氮基丙基2,6‑二‑O‑正十二烷基‑3,4‑O‑异丙叉基‑β‑D‑吡喃半乳糖苷、3’‑叠氮基丙基2,6‑二‑O‑正十四烷基‑3,4‑O‑异丙叉基‑β‑D‑吡喃半乳糖苷、3’‑叠氮基丙基2,6‑二‑O‑正十六烷基‑3,4‑O‑异丙叉基‑β‑D‑吡喃半乳糖苷和3’‑叠氮基丙基2,6‑二‑O‑正十八烷基‑3,4‑O‑异丙叉基‑β‑D‑吡喃半乳糖苷；(9)以二氯甲烷为反应溶剂，3’‑叠氮基丙基2,6‑二‑O‑正十二烷基‑3,4‑O‑异丙叉基‑β‑D‑吡喃半乳糖苷、3’‑叠氮基丙基2,6‑二‑O‑正十四烷基‑3,4‑O‑异丙叉基‑β‑D‑吡喃半乳糖苷、3’‑叠氮基丙基2,6‑二‑O‑正十六烷基‑3,4‑O‑异丙叉基‑β‑D‑吡喃半乳糖苷、3’‑叠氮基丙基2,6‑二‑O‑正十八烷基‑3,4‑O‑异丙叉基‑β‑D‑吡喃半乳糖苷分别与三氟乙酸反应脱去异丙叉基，经相应的分离纯化处理分别得到白色固体3’‑叠氮基丙基2,6‑二‑O‑正十二烷基‑β‑D‑吡喃半乳糖苷、3’‑叠氮基丙基2,6‑二‑O‑正十四烷基‑β‑D‑吡喃半乳糖苷、3’‑叠氮基丙基2,6‑二‑O‑正十六烷基‑β‑D‑吡喃半乳糖苷和3’‑叠氮基丙基2,6‑二‑O‑正十八烷基‑β‑D‑吡喃半乳糖苷；(10)以甲醇为反应溶剂，钯碳为催化剂，3’‑叠氮基丙基2,6‑二‑O‑正十二烷基‑β‑D‑吡喃半乳糖苷、3’‑叠氮基丙基2,6‑二‑O‑正十四烷基‑β‑D‑吡喃半乳糖苷、3’‑叠氮基丙基2,6‑二‑O‑正十六烷基‑β‑D‑吡喃半乳糖苷、3’‑叠氮基丙基2,6‑二‑O‑正十八烷基‑β‑D‑吡喃半乳糖苷分别与甲醛和氢气反应得到叔胺，经相应的分离纯化处理得到白色固体3’‑N,N‑二甲胺基丙基2,6‑二‑O‑正十二烷基‑β‑D‑吡喃半乳糖苷、3’‑N,N‑二甲胺基丙基2,6‑二‑O‑正十四烷基‑β‑D‑吡喃半乳糖苷、3’‑N,N‑二甲胺基丙基2,6‑二‑O‑正十六烷基‑β‑D‑吡喃半乳糖苷和3’‑N,N‑二甲胺基丙基2,6‑二‑O‑正十八烷基‑β‑D‑吡喃半乳糖苷；(11)步骤(10)得到的3’‑N,N‑二甲胺基丙基2,6‑二‑O‑正十二烷基‑β‑D‑吡喃半乳糖苷、3’‑N,N‑二甲胺基丙基2,6‑二‑O‑正十四烷基‑β‑D‑吡喃半乳糖苷、3’‑N,N‑二甲胺基丙基2,6‑二‑O‑正十六烷基‑β‑D‑吡喃半乳糖苷、3’‑N,N‑二甲胺基丙基2,6‑二‑O‑正十八烷基‑β‑D‑吡喃半乳糖苷分别与碘甲烷进行季铵盐化反应，经相应的分离纯化处理分别得到淡黄色固体3’‑(N,N,N‑三甲基碘化铵基)丙基2,6‑二‑O‑正十二烷基‑β‑D‑吡喃半乳糖苷、白色固体3’‑(N,N,N‑三甲基碘化铵基)丙基2,6‑二‑O‑正十四烷基‑β‑D‑吡喃半乳糖苷、白色固体3’‑(N,N,N‑三甲基碘化铵基)丙基2,6‑二‑O‑正十六烷基‑β‑D‑吡喃半乳糖苷和白色固体3’‑(N,N,N‑三甲基碘化铵基)丙基2,6‑二‑O‑正十八烷基‑β‑D‑吡喃半乳糖苷；(12)以四氢呋喃和水为反应混合溶剂，用三苯基膦还原步骤(6)得到的3’‑叠氮基丙基β‑D‑吡喃半乳糖苷，经相应的分离纯化处理得无色浆状物3’‑氨基丙基β‑D‑吡喃半乳糖苷；(13)以甲醇和乙醇为反应混合溶剂，无水碳酸钾提供碱性环境，在加热的条件下，步骤(12)得到的3’‑氨基丙基β‑D‑吡喃半乳糖苷分别与月桂基溴、肉豆寇基溴、鲸蜡基溴、硬脂基溴反应，经相应的分离纯化处理分别得到白色固体3’‑(N,N‑二正十二烷基)丙基β‑D‑吡喃半乳糖苷、3’‑(N,N‑二正十四烷基)丙基β‑D‑吡喃半乳糖苷、3’‑(N,N‑二正十六烷基)丙基β‑D‑吡喃半乳糖苷、3’‑(N,N‑二正十八烷基)丙基β‑D‑吡喃半乳糖苷；(14)以四氢呋喃为反应溶剂，步骤(13)得到的3’‑(N,N‑二正十二烷基)丙基β‑D‑吡喃半乳糖苷、3’‑(N,N‑二正十四烷基)丙基β‑D‑吡喃半乳糖苷、3’‑(N,N‑二正十六烷基)丙基β‑D‑吡喃半乳糖苷、3’‑(N,N‑二正十八烷基)丙基β‑D‑吡喃半乳糖苷分别与碘甲烷进行季铵盐化反应，经相应的分离纯化处理得白色粉末状固体3’‑(N‑甲基‑N,N‑二正十二烷基碘化铵基)丙基β‑D‑吡喃半乳糖苷、3’‑(N‑甲基‑N,N‑二正十四烷基碘化铵基)丙基β‑D‑吡喃半乳糖苷、3’‑(N‑甲基‑N,N‑二正十六烷基碘化铵基)丙基β‑D‑吡喃半乳糖苷、3’‑(N‑甲基‑N,N‑二正十八烷基碘化铵基)丙基β‑D‑吡喃半乳糖苷；(15)步骤(11)和步骤(14)得到的固体经超声波振荡水分散后得到相应的半乳糖衍生物阳离子脂质体纳米颗粒。