[发明专利]一种由粗品肝素钠生产低分子量肝素钠的方法

摘要

本发明公开了一种由粗品肝素钠生产低分子量肝素钠的方法，以粗品肝素钠为原料，在一定条件下经过纯化和降解获得高纯度、高质量的低分子量肝素钠。本发明的粗品肝素钠生产低分子量肝素钠的方法的优点是低分子量肝素钠制备成本低，所得低分子量肝素钠蛋白含量低、纯度高，而且收率高。

主权项

一种由粗品肝素钠生产低分子量肝素钠的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）取一定量粗品肝素钠溶于浓度为2％的NaCl溶液中，得粗品肝素钠溶液，加入碱性蛋白酶，于40~50℃下保温酶解4~5h；（2）将步骤（1）所得酶解液升温至92~94℃灭活，降温至40~50℃，滴加NaOH溶液调节pH为11~12，加入蒙脱土，搅拌后高速离心，取上层清液；（3）将所得澄清液降温至0~4℃之间，加入聚合硅酸铝盐，用HCl溶液调节 pH 值至2~3，高速离心，弃去不溶杂质；（4）步骤（3）所得清液加NaOH溶液调节pH为6~7，加入0.3~0.5倍溶液体积的无水乙醇沉淀，调整温度至0～4℃，放置6～15h，收集沉淀物，并将沉淀物溶于6~12倍体积的蒸馏水中，完全溶解后，加入溶液体积 0.5~1v％的过氧化氢氧化8~12h，用滤膜过滤，加入溶液体积2倍量的乙醇沉淀，沉淀放置6~15h，得到沉淀物；（5）将步骤（4）所得沉淀物溶于蒸馏水中，搅拌下缓慢加入亚硝酸钠降解肝素钠，直至降解反应结束，加入用氢氧化钠，再加入硼氢化钠对肝素钠进行还原，还原结束后使用超滤膜过滤，所得滤液加入2倍的乙醇并充分搅拌，用乙醇脱水，浓缩并冷冻干燥后即得低分子量肝素钠。