[发明专利]一种铁皮石斛种胚微粒的克隆培养技术

摘要

本发明公开一种铁皮石斛种胚微粒的克隆培养技术，主要应用于具有药用、食用价值的高品质铁皮石斛原球茎的大规模生产。本发明专利选用铁皮石斛的成熟果荚，经无菌消毒后取出种胚微料接入克隆液体培养基，通气低温暗培养一周后，转入光照27℃下继续通气悬浮培养三周，至种胚微粒完成萌发、膨胀、转绿，形成锥形小原球茎，此可作为铁皮石斛药用原球茎大规模生产的种质材料。本发明采用铁皮石斛原球茎专用通气悬浮培养装置进行克隆培养，可以为培养过程不断地提供新鲜溶氧、有效的搅拌和实时补料，促进种胚快速生长，整个培养周期仅为一个月，与传统培养技术需3‑4个月相比，大大缩短了生产周期，且单批次生产规模大、产量高、成本低，由于是应用克隆技术，可以有效保障植物体的遗传稳定性和安全性。

主权项

1.一种铁皮石斛种胚微粒的克隆培养方法，其特征在于，包括以下内容：①选用铁皮石斛成熟果荚中的种胚微粒作为接种材料；②将铁皮石斛种胚微粒接入克隆液体培养基中通气悬浮培养；③完成接种后先通气暗培养一周后转入光照27℃下继续通气悬浮培养三周；④从培养时间开始到培养结束过程中每隔一周进行一次补料操作；⑤培养至种胚微粒完全萌发、膨胀、转绿，形成锥形小球茎, 所述内容②中的克隆液体培养的配方为：改良MS培养基，其中硝酸铵更换成硫酸铵，加入量减半，氯化钙加入量减半；植物生长调节剂：6‑ 苄基腺嘌呤0.02份量；渗透调节剂、碳源：蔗糖40份量；氨基酸补充剂、氮源：酸水解酪蛋白0.2份量，天然有机添加物：马铃薯汁150份量，加超纯水配制成1000份量。