[发明专利]一种酶法水解商陆皂苷甲制备商陆皂苷乙的方法

摘要

本发明公开了一种酶法水解商陆皂苷甲制备商陆皂苷乙的方法。该方法使用β‑葡萄糖苷酶选择性水解商陆皂苷甲的β‑1,4‑葡萄糖苷键，制得相应的单糖皂苷商陆皂苷乙的方法，其步骤包括：将固体β‑葡萄糖苷酶制剂溶解制备相应的酶溶液，通过调整该溶液浓度及反应时间，可以选择性将商陆皂苷甲水解转化为商陆皂苷乙，但不继续转化成苷元。转化液通过有机溶剂萃取，HPLC分离纯化得到商陆皂苷乙。本方法能够克服传统化学方法水解商陆皂苷甲选择性差、污染严重、效率低等缺点，以及微生物发酵造成的操作繁琐、产物不单一、产物纯化困难等不足之处。

主权项

1.一种酶法水解商陆皂苷甲制备商陆皂苷乙的方法，其特征在于按照以下步骤进行：1)取20‑50mg的商陆皂苷甲置于反应瓶中，按照10：1：0.5的体积比依次加入缓冲液、β‑葡萄糖苷酶溶液和CaCl₂激活剂后共孵育，以TLC法监测反应进行；2)商陆皂苷乙的制备：将上述转化液于4℃下20000g离心10min，上清液用等倍体积的乙酸乙酯萃取，沉淀以等倍体积的乙酸乙酯溶解，40‑50℃减压浓缩后溶于等体积甲醇，过制备型色谱柱即得到商陆皂苷乙。