[发明专利]一种耐热耐酸碱的木聚糖酶及其制备方法和用途

摘要

本发明提供了一种耐热耐酸碱的木聚糖酶，该木聚糖酶由巴斯德毕赤酵母菌培养分泌而得，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明所提供的耐热耐酸碱的木聚糖酶的制备方法如下将巴斯德毕赤酵母菌接种到培养基上进行菌种活化，将活化好的菌种扩大培养，然后接种到种子罐培养基中进行种子罐培养，经种子罐培养之后得到种子液，将种子液接种到发酵罐的酵母发酵培养基中进行发酵罐培养，将发酵培养结束的料液离心过滤处理，得到粗酶液，将粗酶液进行浓缩，用载体吸附浓缩后的酶液，干燥、粉碎、调配，即制得木聚糖酶产品。本发明所提供的耐热耐酸碱的木聚糖酶品质稳定、耐热耐酸碱、酶活性高，能够应用于家禽家畜饲料中。

主权项

一种耐热耐酸碱的木聚糖酶，该木聚糖酶由巴斯德毕赤酵母菌培养分泌而得，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述的巴斯德毕赤酵母菌保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为：CGMCC NO：10569，其特征在于所述的耐热耐酸碱的木聚糖酶的制备方法包括以下步骤：将巴斯德毕赤酵母菌接种到培养基上进行菌种活化，将活化好的菌种扩大培养，然后接种到种子罐培养基中进行种子罐培养，经种子罐培养之后得到种子液，将种子液接种到发酵罐的酵母发酵培养基中进行发酵罐培养，将发酵培养结束的料液离心过滤处理，得到粗酶液，将粗酶液进行浓缩，用载体吸附浓缩后的酶液，干燥、粉碎、调配，即制得木聚糖酶产品；具体步骤为：(1)、菌种活化：将保藏编号为：CGMCC NO：10569的巴斯德毕赤酵母菌接种到YPD培养基上，在28～34℃、pH4.5～6.0条件下进行活化，培养22～26h；(2)、扩大培养：将活化好的菌种，以1～3％的比例接种到含有种子培养基的摇瓶中，于28～34℃、pH4.5～6.0条件下，以180～240r/min的转速进行培养；(3)、种子罐培养：扩大培养22～26h之后，以8～12％的比例接种到种子罐培养基中，于26～34℃条件下进行培养；(4)、发酵罐培养：经种子罐培养之后得到的种子液，以8～12％的接种量接种到发酵罐的酵母发酵培养基中，于35～40℃、pH4.5～6.0条件下进行发酵培养，120～140h之后发酵结束；(5)、离心过滤处理：将毕赤酵母液体发酵培养结束的料液，在4000～6000r/min转速下离心10～20min，取上清液，滤纸过滤，得到粗酶液；(6)、浓缩：用截留膜分子量为10000Da的有机超滤膜包将粗酶液的体积浓缩至原来的1/6～1/8；(7)、干燥：用麸皮、玉米芯和淀粉的混合物作为载体吸附浓缩后的酶液，于55～65℃鼓风条件下干燥至含水量为8～10％为止，再经过粉碎和调配即制得木聚糖酶产品。