[发明专利]一种小麦整体遗传转化的方法

摘要

本发明公开了遗传工程技术领域中的一种小麦整体遗传转化的方法，具体的说是一种小麦种子整体侵染的方法，它包括测成熟小麦种子生理吸胀曲线；含目标基因的根癌农杆菌培养；小麦种子的灭菌；将经灭菌的小麦种子转入根癌农杆菌液中侵染；共培养；抗性植株的筛选；抗性植株的生根培养；转化植株炼苗及移栽步骤。本发明由农杆菌介导的小麦遗传转化方法，大大提高转化效率和转化植株获得数量，缩短实验周期2-3个月，简化实验过程和转化后的鉴定工作量，对小麦基因工程的理论研究及遗传育种具有重要意义。

主权项

一种小麦整体遗传转化的方法，该方法是采用小麦种子整体侵染的方法实现的，其特征在于：所述方法的步骤为：①称量浸泡不同时间段的成熟小麦种子的重量，测出成熟小麦种子的生理吸胀曲线；② 含有目标基因的根癌农杆菌培养；③ 小麦种子消毒灭菌；④ 根据小麦种子的生理吸胀曲线，确定用根癌农杆菌菌液浸泡成熟小麦种子的时间为10‑12小时；⑤ 在25℃黑暗条件下，用无菌水培养3天；⑥ 抗性植株的筛选，筛选抗性植株的压力筛选条件是：无菌水和250mg·L^‑1 Cef和75‑100 mg·L^‑1 Kan组成；⑦ 抗性植株的生根培养，抗性植株的生根培养是在加入250 mg·L^‑1 Cef 和0‑100 mg·L^‑1 Kan组成；⑧ 转化植株炼苗及移栽。