[发明专利]一种烟草专用的海洋生物肥料及其制备方法和应用

摘要

本发明提供了一种烟草专用的海洋生物肥料及其制备方法和应用，本发明利用对烟草的外观及内在质量提高有明显促进作用的浒苔多糖，以及筛选到的一种具有抗病毒及真菌病的花域芽孢杆菌SJ菌株（保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.7571）所产的胞外多糖，制备出所述烟草专用的海洋生物肥料。本发明可降低烟叶重金属含量，烟叶总糖及还原糖含量增加，可使增强烟草的抗病促生的能力。将所述海洋生物肥料用于烟草使用不仅可以达到绿色环保、高效新型的目的，而且可显著提高烟叶质量，更可为农户增收、地方财税增收做出重要贡献，具有良好的市场应用前景。

主权项

一种烟草专用的海洋生物肥料的制备方法，其特征在于它包括以下步骤：（1）花域芽孢杆菌SJ菌株的胞外多糖的提取：将菌株接种于pH6.8 ～ 7.4的种子培养基，在温度30～35℃、培养18～24 小时，获种子培养液；种子培养液以质量比3％～10％的接种量接种于多糖发酵培养基中，在发酵温度24 ～ 32℃、通风比1∶0.3～0.8 发酵18～24h，离心去菌体，制成胞外代谢物的发酵上清液；按照质量比为发酵上清液：95%乙醇：CaCl2=1：1.5：2.5混匀，均匀搅拌后产生沉淀，真空干燥，得微生物胞外多糖即为菌株SJ的胞外多糖；（2）浒苔多糖的提取：将浒苔干粉溶于水中浸泡，在温度为60℃、200W超声波频率下破壁，向破壁后溶液中加入20PFU/g纤维素酶和30PFU/g蛋白酶复合酶提取得到浒苔多糖水溶液；离心分离取上清液进行电场絮凝沉淀，进一步固液分离，将清液真空浓缩，低温冷冻干燥，制得呈粉剂的浒苔多糖；（3）胞外多糖和浒苔多糖的复配：将所述浒苔多糖和菌株SJ的胞外多糖混合溶于水中，控制浒苔多糖的质量比浓度为0.05‰～2‰，控制胞外多糖的质量比浓度为0.05‰～2‰，加热使其溶解，过筛灭菌密封即得所述海洋生物肥料；所述花域芽孢杆菌SJ菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC No.7571；所述种子培养基配方为：蛋白胨5‑10g/L，牛肉膏1‑3g/L，氯化钠1‑5g/L，氯化铁0.05‑0.3g/L，余量为蒸馏水，pH6.8～7.4；所述多糖发酵培养基配方为：蔗糖1.0～25g/L，淀粉5.0～10g/L，豆粕10.0～30g/L，蛋白胨1.0～10g/L，碳酸钙1.0～8.0g/L，磷酸氢二钾1.0～1.0g/L，硫酸镁0.5～1.0g/L，硫酸锰0.001～0.2g/L，余量为蒸馏水，pH 7.0～8.5。