[发明专利]选择性抑制引物二聚体扩增的小分子肝素在审
申请号: | 201510090536.1 | 申请日: | 2015-02-28 |
公开(公告)号: | CN105985947A | 公开(公告)日: | 2016-10-05 |
发明(设计)人: | 江洪;岳素文;何玉贵 | 申请(专利权)人: | 北京万达因生物医学技术有限责任公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C12Q1/68 |
代理公司: | 北京中海智圣知识产权代理有限公司 11282 | 代理人: | 胡静 |
地址: | 100085 北京市海淀*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明涉及选择性抑制引物二聚体扩增的小分子肝素,采用分子量为2000-4000dalton、终浓度为2%×10-6(w/v)至1%×10-7(w/v)的小分子肝素(/肝素钠)配合优化设计的引物进行密闭PCR,在不影响靶特异性扩增效率的情况下,能够选择性地竞争抑制引物二聚体PD非特异性扩增;从而实现彻底杜绝引物二聚体造成的PCR假阳性结果使SYBR GreenⅠ实时荧光PCR等核酸扩增技术对临床检测分析的不利影响。 | ||
搜索关键词: | 选择性 抑制 引物 二聚体 扩增 分子 肝素 | ||
【主权项】:
选择性抑制引物二聚体扩增的小分子肝素,其特征在于,采用小分子肝素选择性抑制引物二聚体扩增的PCR技术方法,逐渐降解缩短的小分子肝素会同比例减低其结合核酸DNA的能力,在低于引物‑靶分子完全配对的结合力而高于引物‑引物间碱基错配聚合力的对应肝素作用浓度范围内选择性地抑制引物二聚体非特异性扩增;其中,小分子肝素分子量为2000‑4000dalton,选择性抑制PCR引物二聚体扩增的小分子肝素浓度范围为:终浓度2%×10‑6(w/v)至1%×10‑7(w/v),小分子肝素能够不影响靶特异性扩增而有效抑制本底引物二聚体非特异性扩增。
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