[发明专利]一种高山被孢霉CCFM442菌株及其用途

摘要

本发明涉及一种高山被孢霉CCFM442菌株及其用途。本发明利用高山被孢霉CCFM442菌株生产菌体饲料添加剂，该生产菌体饲料添加剂的方法包括斜面培养、种子培养、发酵培养以及后处理步骤。该菌体饲料添加剂安全性高。该菌体饲料添加剂中的脂肪酸组成合理，多不饱和脂肪酸在总脂肪酸中的含量达到42.4‑45.8％，ω‑6/ω‑3比为4.5‑5.3，符合WHO和FAO的推荐标准。该菌体饲料添加剂生产所用培养基为廉价葡萄糖和豆粕，二者市场价格较低且容易获得，因此生产成本低。

主权项

一种用高山被孢霉(Mortierella alpina)CCFM442生产菌体饲料添加剂的方法，其特征在于该生产方法的步骤如下：A、斜面培养将冷冻保存的高山被孢霉CCFM442菌株挑取一环接种到PDA斜面培养基上，然后在温度25℃的条件下恒温培养14天，得到所述菌株活化培养物；B、种子培养将步骤A得到的活化培养物挑取一环接种到种子培养基中，然后在温度25℃与200rpm的条件下恒温振荡培养3天，再称得湿菌体重，将湿菌体与无菌水按照湿菌体与无菌水的质量比1：4进行混合，接着用分散机对该混合体系进行分散10min以制备菌悬液，再按照每升所述菌悬液为10mL接种量接种于所述种子培养基中，在温度25℃与转速200rpm的条件下恒温振荡培养36h，得到高山被孢霉CCFM442种子液；C、发酵培养按照以发酵培养基体积计1％‑5％接种量，将步骤B得到的高山被孢霉CCFM442种子液接种到发酵培养基中；首先在温度25℃的条件下培养2天，接着在温度6℃的条件下培养5天，得到含有高山被孢霉CCFM442的发酵液；所述发酵培养基制备方法如下：制备含有50g/L葡萄糖碳源、20g/L豆粕、13.34g/L硝酸钾、3g/L磷酸氢二钾、1g/L硫酸钠、0.5g/L二水合氯化钙与0.5g/L六水合氯化镁的混合物水溶液，将其水溶液的pH调节至6.0，再在温度121℃下灭菌20min，得到所述的发酵培养基；D、后处理让步骤C得到的含有高山被孢霉CCFM442的发酵液进行离心分离，得到的湿菌体用蒸馏水进行洗涤，再离心分离，洗涤湿菌体接着干燥，于是得到一种干燥菌体，即所述的菌体饲料添加剂；高山被孢霉(Mortierella alpina)CCFM442，该菌株已于2014年12月25日在北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，其保藏号为CGMCC No.10295。