[发明专利]一种草莓茎尖超低温脱毒的方法

摘要

本发明公开了一种草莓茎尖超低温脱毒的方法，属于草莓脱毒技术领域。所述的草莓茎尖超低温脱毒的方法，具体包括以下步骤：取感染病毒的草莓外植体，切取茎尖，预培养，投入液氮，化冻和洗涤，恢复培养和植株再生，再生植株病原体检测。本发明超低温冷冻疗法应用到草莓脱毒的领域，建立了草莓茎尖超低温脱毒的方法，具有操作简单，耗时短和脱毒率高的优点。本发明的草莓茎尖超低温脱毒方法的超低温保存成活率为69.03％，其脱毒率达100％，具有很好的技术效果和推广前景。

主权项

一种草莓茎尖超低温脱毒的方法，其特征在于：具体包括以下步骤：剥离2mm草莓茎尖转移至预培养基，在4℃黑暗条件下进行预培养，蔗糖浓度为0.3～0.5mol·L^‑1，预培养时间为3～5d，预培养结束后的茎尖，在25℃条件下放入60％PVS₂培养基中加载30～90min后，转移至PVS₂培养基溶液中，于0℃条件下处理1～3h，然后转入1.5ml冻存管中，投入液氮中处理1h，将冻存管快速转移至40℃水中，水浴化冻2min后的茎尖放入洗液中洗涤2次，每次20min，直至茎尖漂浮在洗液表面，最后将处理结束的茎尖转入恢复培养基中，21～25℃暗培养一周后转入16h·d^‑1光照下培养，光照强度为52μmol·(m²·s)^‑1，获得草莓脱毒苗。