[发明专利]一种牛胚胎玻璃化冷冻甩管解冻和直接移植方法有效
| 申请号： | 201510015346.3 | 申请日： | 2015-01-12 |
| 公开（公告）号： | CN104488853B | 公开（公告）日： | 2016-08-24 |
| 发明（设计）人： | 朱士恩;傅祥伟;周艳华;张有文 | 申请（专利权）人： | 中国农业大学 |
| 主分类号： | A01N1/02 | 分类号： | A01N1/02;A61D19/04 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司11002 | 代理人： | 王文君 |
| 地址： | 100193 *** | 国省代码： | 北京;11 |
| 权利要求书： | 暂无信息 | 说明书： | 暂无信息 |
| 摘要： | 本发明提供一种牛胚胎玻璃化冷冻甩管解冻和直接移植方法，属于胚胎低温生物学技术领域。本发明方法包括(1)牛胚胎冷冻用细管中先加入一段解冻液，然后装入一段空气；(2)装入一段冷冻液，再装入一段空气；(3)装入一段冷冻液，并在该段冷冻液中置入牛胚胎，再装入一段空气；(4)装入一段解冻液并封闭管口，冷冻；(5)甩管解冻，直接移植；冷冻液为含有EG、聚蔗糖和蔗糖的mPBS溶液，解冻液为含FBS的mPBS溶液。本发明方法操作简便，对操作人员技术要求不高，冷冻后的牛胚胎甩管解冻后可直接移植，解冻后的胚胎存活率100％，扩张率94％，移植后妊娠率达57％，是一种高效、简便易行的方法，适用于产业化推广。 | ||
| 搜索关键词： | 种牛 胚胎 玻璃化 冷冻 解冻 直接 移植 方法 | ||
【主权项】：
玻璃化冷冻液以及解冻液在冷冻牛胚胎和解冻牛胚胎中的应用，其特征在于，所述冷冻牛胚胎为将牛胚胎置于该冷冻液中，于液氮中冷冻保存；所述冷冻液通过以下方法配制得到：a)mPBS溶液中加入聚蔗糖和蔗糖，使其终浓度分别为300g/L和0.5mol/L，得到FS溶液；b)向FS溶液中加入乙二醇，二者体积比为65：35，得到EFS35溶液即为冷冻液；所述用于解冻牛胚胎的解冻液为含10％(V/V)胎牛血清的mPBS溶液，其配制为：向mPBS溶液中加入胎牛血清，二者体积比为9:1。
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