[发明专利]多路靶标检测测定法

摘要

本文提供了用于在单管、单色测定法中检测多靶标序列的试剂和试剂盒以及其使用方法。具体而言，提供用于检测复杂结核分枝杆菌靶标序列(例如katG、rpoB、inhA启动子、pncA等)的多路测定法。

主权项

用于分析样品中的单链核酸靶标序列的方法，包括：(a) 使包含第一单链核酸靶标序列和至少第二单链核酸靶标序列的样品与检测试剂接触，所述检测试剂包含针对各靶标序列的多组探针对，所述探针对的每一个包含：(i) 用非荧光猝灭剂标记的至少一个猝灭剂探针，和(ii) 用荧光染料标记的至少一个发信号探针，其中当发信号探针未结合至靶标序列时，自发信号探针发射背景信号，其中当发信号探针结合至靶标序列但猝灭剂探针未结合至靶标序列时，自发信号探针发射高于背景的信号，其中当发信号探针和猝灭剂探针两者均结合至靶标序列时，来自发信号探针的信号被非荧光猝灭剂猝灭；其中各探针组的发信号探针用相同的荧光染料标记；其中所述第一靶标的探针组结合至正常、未突变、非病原的序列的温度范围与所述第二靶标的探针组结合至所述第二靶标的正常、未突变、非病原的序列的温度范围重叠，(b) 作为温度的函数分析来自发信号探针的信号。