[发明专利]宿主细胞修饰的方法有效
| 申请号： | 201480066861.8 | 申请日： | 2014-10-13 |
| 公开（公告）号： | CN106062203B | 公开（公告）日： | 2020-08-07 |
| 发明（设计）人： | M.瓦克;M.科瓦里克;F.弗南德茨 | 申请（专利权）人： | 葛兰素史密丝克莱恩生物有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/90 | 分类号： | C12N15/90;A61K39/104;C12N15/70;C12N5/10 |
| 代理公司： | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人： | 翟建伟;彭昶 |
| 地址： | 比利时里*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | 本文描述将核酸序列插入宿主细胞的方法。本文还描述包含插入核酸序列的遗传稳定的宿主细胞和将这样的宿主细胞用于产生蛋白的方法。 | ||
| 搜索关键词： | 宿主 细胞 修饰 方法 | ||
【主权项】：
宿主细胞，其含有供体质粒和辅助质粒，(a)其中所述辅助质粒含有：(i)在第一启动子控制下的编码lamda red重组酶的开放阅读框；和(ii)在第二启动子控制下的编码限制性内切核酸酶的开放阅读框，所述限制性内切核酸酶具有宿主细胞基因组中不存在的识别序列；以及(b)其中所述供体质粒含有：(i)从5'至3'：(1)所述限制性内切核酸酶的识别序列，(2)至少0.5千碱基(kb)的第一同源区，(3)至少8 kb的异源插入DNA；和(4)至少0.5 kb的第二同源区；以及(ii)反选择标记物。
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