[发明专利]用于刺激植物生长、保护植物以及将杆菌孢子固定在植物上的融合蛋白和方法

摘要

本发明总体上涉及含有靶向序列的融合蛋白，所述靶向序列使融合蛋白靶向蜡样芽孢杆菌家族成员的外孢壁。本发明还涉及表达所述融合蛋白的重组蜡样芽孢杆菌家族成员以及含有表达所述融合蛋白的所述重组蜡样芽孢杆菌家族成员的制剂。还描述了通过向植物或植物生长介质施用所述重组蜡样芽孢杆菌家族成员或所述制剂刺激植物生长、保护植物免于病原体的侵害以及提高植物的胁迫抗性的方法。本发明还涉及用于将表达融合蛋白的重组蜡样芽孢杆菌家族成员的孢子固定在植物上的方法。

主权项

一种融合蛋白，其包含至少一种植物生长刺激蛋白或肽、至少一种提高植物的胁迫抗性的蛋白或肽、或至少一种植物结合蛋白或肽，以及：(a)包含与SEQ ID NO:1的氨基酸20‑35具有至少约43％同一性的氨基酸序列的靶向序列，其中与氨基酸25‑35的同一性是至少约54％；(b)包含SEQ ID NO:1的氨基酸1‑35的靶向序列；(c)包含SEQ ID NO:1的氨基酸20‑35的靶向序列；(d)包含SEQ ID NO:1的靶向序列；(e)包含与SEQ ID NO:2具有至少85％同一性的氨基酸序列的外孢壁蛋白；(f)包含SEQ ID NO:3的氨基酸1‑27的靶向序列；(g)包含SEQ ID NO:3的氨基酸12‑27的靶向序列；(h)包含SEQ ID NO:3的靶向序列；(i)包含与SEQ ID NO:4具有至少85％同一性的氨基酸序列的外孢壁蛋白；(j)包含SEQ ID NO:5的氨基酸1‑38的靶向序列；(k)包含SEQ ID NO:5的氨基酸23‑38的靶向序列；(l)包含SEQ ID NO:5的靶向序列；(m)包含与SEQ ID NO:6具有至少85％同一性的氨基酸序列的外孢壁蛋白；(n)包含SEQ ID NO:7的氨基酸1‑28的靶向序列；(o)包含SEQ ID NO:7的氨基酸13‑28的靶向序列；(p)包含SEQ ID NO:7的靶向序列；(q)包含与SEQ ID NO:8具有至少85％同一性的氨基酸序列的外孢壁蛋白；(r)包含SEQ ID NO:9的氨基酸1‑24的靶向序列；(s)包含SEQ ID NO:9的氨基酸9‑24的靶向序列；(t)包含SEQ ID NO:9的靶向序列；(u)包含与SEQ ID NO:10具有至少85％同一性的氨基酸序列的外孢壁蛋白；(v)包含SEQ ID NO:11的氨基酸1‑33的靶向序列；(w)包含SEQ ID NO:11的氨基酸18‑33的靶向序列；(x)包含SEQ ID NO:11的靶向序列；(y)包含与SEQ ID NO:12具有至少85％同一性的氨基酸序列的外孢壁蛋白；(z)包含SEQ ID NO:13的氨基酸1‑33的靶向序列；(aa)包含SEQ ID NO:13的氨基酸18‑33的靶向序列；(ab)包含SEQ ID NO:13的靶向序列；(ac)包含与SEQ ID NO:14具有至少85％同一性的氨基酸序列的外孢壁蛋白；(ad)包含SEQ ID NO:15的氨基酸1‑43的靶向序列；(ae)包含SEQ ID NO:15的氨基酸28‑43的靶向序列；(af)包含SEQ ID NO:15的靶向序列；(ag)包含与SEQ ID NO:16具有至少85％同一性的氨基酸序列的外孢壁蛋白；(ah)包含SEQ ID NO:17的氨基酸1‑27的靶向序列；(ai)包含SEQ ID NO:17的氨基酸12‑27的靶向序列；(aj)包含SEQ ID NO:17的靶向序列；(ak)包含与SEQ ID NO:18具有至少85％同一性的氨基酸序列的外孢壁蛋白；(al)包含SEQ ID NO:19的氨基酸1‑33的靶向序列；(am)包含SEQ ID NO:19的氨基酸18‑33的靶向序列；(an)包含SEQ ID NO:19的靶向序列；(ao)包含与SEQ ID NO:20具有至少85％同一性的氨基酸序列的外孢壁蛋白；(ap)包含SEQ ID NO:21的氨基酸1‑33的靶向序列；(aq)包含SEQ ID NO:21的氨基酸18‑33的靶向序列；(ar)包含SEQ ID NO:21的靶向序列；(as)包含与SEQ ID NO:22具有至少85％同一性的氨基酸序列的外孢壁蛋白；(at)包含SEQ ID NO:23的氨基酸1‑24的靶向序列；(au)包含SEQ ID NO:23的氨基酸9‑24的靶向序列；(av)包含SEQ ID NO:23的靶向序列；(aw)包含与SEQ ID NO:24具有至少85％同一性的氨基酸序列的外孢壁蛋白；(ax)包含SEQ ID NO:25的氨基酸1‑24的靶向序列；(ay)包含SEQ ID NO:25的氨基酸9‑24的靶向序列；(az)包含SEQ ID NO:25的靶向序列；(ba)包含与SEQ ID NO:26具有至少85％同一性的氨基酸序列的外孢壁蛋白；(bb)包含SEQ ID NO:27的氨基酸1‑30的靶向序列；(bc)包含SEQ ID NO:27的氨基酸15‑30的靶向序列；(bd)包含SEQ ID NO:27的靶向序列；(be)包含与SEQ ID NO:28具有至少85％同一性的氨基酸序列的外孢壁蛋白；(bf)包含SEQ ID NO:29的氨基酸1‑33的靶向序列；(bg)包含SEQ ID NO:29的氨基酸18‑33的靶向序列；(bh)包含SEQ ID NO:29的靶向序列；(bi)包含与SEQ ID NO:30具有至少85％同一性的氨基酸序列的外孢壁蛋白；(bj)包含SEQ ID NO:31的氨基酸1‑24的靶向序列；(bk)包含SEQ ID NO:31的氨基酸9‑24的靶向序列；(bl)包含SEQ ID NO:31的靶向序列；(bm)包含与SEQ ID NO:32具有至少85％同一性的氨基酸序列的外孢壁蛋白；(bn)包含SEQ ID NO:33的氨基酸1‑15的靶向序列；(bo)包含SEQ ID NO:33的靶向序列；(bp)包含与SEQ ID NO:34具有至少85％同一性的氨基酸序列的外孢壁蛋白；(bq)包含SEQ ID NO:35的氨基酸1‑16的靶向序列；(br)包含SEQ ID NO:35的靶向序列；(bs)包含与SEQ ID NO:36具有至少85％同一性的氨基酸序列的外孢壁蛋白；(bt)包含SEQ ID NO:43的氨基酸1‑29的靶向序列；(bu)包含SEQ ID NO:43的氨基酸14‑29的靶向序列；(bv)包含SEQ ID NO:43的靶向序列；(bw)包含与SEQ ID NO:44具有至少85％同一性的氨基酸序列的外孢壁蛋白；(bx)包含SEQ ID NO:45的氨基酸1‑35的靶向序列；(by)包含SEQ ID NO:45的氨基酸20‑35的靶向序列；(bz)包含SEQ ID NO:45的靶向序列；(ca)包含与SEQ ID NO:46具有至少85％同一性的氨基酸序列的外孢壁蛋白；(cb)包含SEQ ID NO:47的氨基酸1‑43的靶向序列；(cc)包含SEQ ID NO:47的氨基酸28‑43的靶向序列；(cd)包含SEQ ID NO:47的靶向序列；(ce)包含与SEQ ID NO:48具有至少85％同一性的氨基酸序列的外孢壁蛋白；(cf)包含SEQ ID NO:49的氨基酸1‑32的靶向序列；(cg)包含SEQ ID NO:49的氨基酸17‑32的靶向序列；(ch)包含SEQ ID NO:49的靶向序列；(ci)包含与SEQ ID NO:50具有至少85％同一性的氨基酸序列的外孢壁蛋白；(cj)包含SEQ ID NO:51的氨基酸1‑33的靶向序列；(ck)包含SEQ ID NO:51的氨基酸18‑33的靶向序列；(cl)包含SEQ ID NO:51的靶向序列；(cm)包含与SEQ ID NO:52具有至少85％同一性的氨基酸序列的外孢壁蛋白；(cn)包含SEQ ID NO:53的氨基酸1‑33的靶向序列；(co)包含SEQ ID NO:53的氨基酸18‑33的靶向序列；(cp)包含SEQ ID NO:53的靶向序列；(cq)包含与SEQ ID NO:54具有至少85％同一性的氨基酸序列的外孢壁蛋白；(cr)包含SEQ ID NO:55的氨基酸1‑30的靶向序列；(cs)包含SEQ ID NO:55的氨基酸15‑30的靶向序列；(ct)包含SEQ ID NO:55的靶向序列；(cu)包含与SEQ ID NO:56具有至少85％同一性的氨基酸序列的外孢壁蛋白；(cv)包含SEQ ID NO:57的氨基酸1‑130的靶向序列；(cw)包含SEQ ID NO:57的氨基酸115‑130的靶向序列；(cx)包含SEQ ID NO:57的靶向序列；(cy)包含与SEQ ID NO:58具有至少85％同一性的氨基酸序列的外孢壁蛋白；(cz)包含与SEQ ID NO:59具有至少85％同一性的氨基酸序列的外孢壁蛋白片段；(da)包含SEQ ID NO:60的靶向序列；(db)包含SEQ ID NO:61的靶向序列；(dc)包含SEQ ID NO:62的靶向序列；(dd)包含SEQ ID NO:63的靶向序列；(de)包含SEQ ID NO:64的靶向序列；(df)包含SEQ ID NO:65的靶向序列；(dg)包含SEQ ID NO:66的靶向序列；(dh)包含SEQ ID NO:67的靶向序列；(di)包含SEQ ID NO:68的靶向序列；(dj)包含SEQ ID NO:69的靶向序列；(dk)包含SEQ ID NO:70的靶向序列；(dl)包含与SEQ ID NO:71具有至少85％同一性的氨基酸序列的外孢壁蛋白；(dm)包含与SEQ ID NO:72具有至少85％同一性的氨基酸序列的外孢壁蛋白；(dn)包含与SEQ ID NO:73具有至少85％同一性的氨基酸序列的外孢壁蛋白；(do)包含与SEQ ID NO:74具有至少85％同一性的氨基酸序列的外孢壁蛋白；(dp)包含与SEQ ID NO:75具有至少85％同一性的氨基酸序列的外孢壁蛋白；(dq)包含与SEQ ID NO:76具有至少85％同一性的氨基酸序列的外孢壁蛋白；(dr)包含与SEQ ID NO:77具有至少85％同一性的氨基酸序列的外孢壁蛋白；(ds)包含与SEQ ID NO:78具有至少85％同一性的氨基酸序列的外孢壁蛋白；(dt)包含与SEQ ID NO:79具有至少85％同一性的氨基酸序列的外孢壁蛋白；(du)包含与SEQ ID NO:80具有至少85％同一性的氨基酸序列的外孢壁蛋白；(dv)包含与SEQ ID NO:81具有至少85％同一性的氨基酸序列的外孢壁蛋白；(dw)包含与SEQ ID NO:82具有至少85％同一性的氨基酸序列的外孢壁蛋白；(dx)包含与SEQ ID NO:83具有至少85％同一性的氨基酸序列的外孢壁蛋白；(dy)包含与SEQ ID NO:84具有至少85％同一性的氨基酸序列的外孢壁蛋白；(dz)包含SEQ ID NO:1的氨基酸22‑31的靶向序列；(ea)包含SEQ ID NO:1的氨基酸22‑33的靶向序列；(eb)包含SEQ ID NO:1的氨基酸20‑31的靶向序列；(ec)包含SEQ ID NO:3的氨基酸14‑23的靶向序列；(ed)包含SEQ ID NO:3的氨基酸14‑25的靶向序列；或(ef)包含SEQ ID NO:3的氨基酸12‑23的靶向序列；其中所述植物生长刺激蛋白或肽包括肽激素、非激素肽、或植物生长刺激化合物的产生或活化所涉及的酶。