[发明专利]一种从蚯蚓中提取的SOD

摘要

本发明涉及一种从蚯蚓中提取的SOD。所述SOD以蚯蚓作为提取原料，由于蚯蚓具有易于养殖、来源广泛、生物安全性高的特点，且蚯蚓中SOD含量较高，是规模化生产SOD的优选原料。具体而言，所述SOD由包括以下步骤的方法制备而成：将蚯蚓浸泡于甲基纤维素溶液中排净沙土；将排沙后的蚯蚓浸泡于磷酸盐缓冲液中，分散成匀浆液，离心后取上清得粗酶液；将硫酸铵加入粗酶液中静置，离心后收集沉淀；将沉淀溶解于磷酸盐缓冲液中，用Sephadex G-25凝胶柱和磷酸盐缓冲液进行洗脱，收集含有蛋白质且不含硫酸铵的洗脱液；将所得洗脱液用金属螯合亲和柱和柠檬酸缓冲液进行洗脱，收集含有蛋白质的洗脱液，浓缩，冷冻干燥，即得SOD。本发明提供的从蚯蚓中提取的SOD纯度高、活性好。

主权项

一种从蚯蚓中提取的SOD，其特征在于，所述SOD由包括以下步骤的方法制备而成：1)将蚯蚓浸泡于浓度0.1～5％的甲基纤维素溶液中，排净沙土后，将蚯蚓清洗干净；2)将步骤1)所得蚯蚓浸泡于pH6.7～6.9的0.045～0.055mol/L磷酸盐缓冲液中，分散成匀浆液，离心后取上清，即得粗酶液；3)将硫酸铵加入步骤2)所得粗酶液中，静置，离心后收集沉淀；4)将步骤3)所得沉淀溶解于pH6.7～6.9的0.01～0.02mol/L磷酸盐缓冲液中，将所得溶液加入平衡好的葡聚糖凝胶柱Sephadex G‑25顶端，用本步骤所述磷酸盐缓冲液进行洗脱，收集含有蛋白质且不含硫酸铵的洗脱液，浓缩，得浓缩液；5)在步骤4)所得浓缩液中加入NaCl，得到NaCl浓度为0.4～0.6mol/L的溶液，将所得溶液加入平衡好的金属螯合亲和柱顶端，用pH值4.1～4.9的0.015～0.025mol/L柠檬酸缓冲液进行洗脱，收集含有蛋白质的洗脱液，浓缩，冷冻干燥，即得SOD。