[发明专利]一种筛选抗生素结合蛋白的方法有效
| 申请号： | 201410821597.6 | 申请日： | 2014-12-25 |
| 公开（公告）号： | CN104502610A | 公开（公告）日： | 2015-04-08 |
| 发明（设计）人： | 彭宣宪;李惠;朱伟聪 | 申请（专利权）人： | 中山大学 |
| 主分类号： | G01N33/68 | 分类号： | G01N33/68 |
| 代理公司： | 广州粤高专利商标代理有限公司44102 | 代理人： | 陈卫 |
| 地址： | 510006广东省广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明属于生物技术领域，具体公开了一种筛选抗生素结合蛋白的方法。本发明利用抗生素应激生物体，获得生物体的应激差异蛋白质组，再通过检测差异蛋白点中的抗生素含量，筛选并鉴定抗生素结合蛋白。本发明方法适用范围广，能够快速、准确地筛选出新的抗生素结合蛋白，对抗生素的检测和耐药菌的防治具有重要的意义。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 筛选 抗生素 结合 蛋白 方法 | ||
【主权项】：
一种筛选抗生素结合蛋白的方法，其特征在于，包括如下步骤： S1. 用抗生素应激生物体，提取生物体全部细胞蛋白进行电泳分离分析，得到应激蛋白质组，比对得到差异蛋白点； S2. 回收差异蛋白点，分别进行抗生素检测，根据差异蛋白点中抗生素的含量，筛选并鉴定抗生素结合蛋白； 其中，S2所述抗生素检测采用间接竞争法，使差异蛋白点中的抗生素和偶联抗原竞争抗生素抗体，以生理盐水处理时对应蛋白点作为阴性对照，并进行吸光值检测；筛选所述吸光值＜100%，且显著性差异p＜0.01的蛋白点为抗生素结合蛋白； 或者，S2所述抗生素检测采用直接测定法，筛选抗生素含量≥5倍阴性对照，且显著性差异p＜0.01的蛋白点为抗生素结合蛋白；所述阴性对照为生理盐水处理时对应蛋白点； S1所述抗生素的浓度≥4倍的最小抑制浓度，且抗生素的浓度≤杀死所述所有生物体的浓度。
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