[发明专利]一种细菌Ⅰ型整合子的荧光定量PCR检测试剂

摘要

本发明公开了一种细菌Ⅰ型整合子的荧光定量PCR检测试剂，是将PCR技术与荧光检测相结合，构建并筛选出上述扩增效率高和特异性好的一对引物和一条探针，克服了常规PCR费时、易污染、准确性较差以及扩增后需电泳检测等缺点，可对细菌中的Ⅰ型整合子进行快速、准确、安全的定性检测，具有简单、易操作、结果直观、敏感性高、重复性好等优点，可减少DNA或PCR产物污染的风险；常规PCR的检测时间一般6小时以上，本发明无需扩增后的电泳分析，样品检测时间在3小时之内，可判断出阳性、阴性和可疑结果，Ct值为40.0可确定为阳性和阴性的临界值，可同时进行大量样品检测，具有高通量性。

主权项

一种细菌Ⅰ型整合子的荧光定量PCR检测试剂，包含一对特异性引物和一条特异性荧光探针，扩增目标片段长度为200 bp，其特征是引物和探针的核苷酸序列分别为：引物：intgerno1 ‑F： CGTAGAAGAACAGCAAGG intgerno1 ‑R： ACGCTACTTGCATTACAG探针： FAM—ACCGAACAGGCTTATGTCCACT—TAMRA其中荧光报告基团FAM标记于探针5′端，不发荧光的淬灭基团TAMRA标记于探针3′端。