[发明专利]黄曲霉毒素B1适配体亲和柱的制备方法有效
| 申请号： | 201410723990.1 | 申请日： | 2014-12-04 |
| 公开（公告）号： | CN104399283A | 公开（公告）日： | 2015-03-11 |
| 发明（设计）人： | 廖且根;罗林广;李伟红;胡丽芳 | 申请（专利权）人： | 江西省农业科学院农产品质量安全与标准研究所 |
| 主分类号： | B01D15/38 | 分类号： | B01D15/38;B01J20/281;G01N1/34 |
| 代理公司： | 江西省专利事务所 36100 | 代理人： | 胡里程 |
| 地址： | 330200 江*** | 国省代码： | 江西;36 |
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| 摘要： | 本发明公开一种黄曲霉毒素B1适配体亲和柱的制备方法，属于亲和层析和真菌毒素分析领域。采用环氧活化琼脂糖微球FF作为固相载体，与氨基修饰黄曲霉毒素B1适配体偶联后，封闭载体中多余活性位点，填入微型小柱制成。所制备的适配体亲和柱能与黄曲霉毒素B1特异性结合，其加标回收率在70~110之间，至少可以重复使用五次。 | ||
| 搜索关键词： | 黄曲霉 毒素 b1 适配体 亲和 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种黄曲霉毒素B1适配体亲和柱的制备方法，其步骤：（1） 活化：取60mg的环氧活化琼脂糖微球FF在2mL去离子水中悬浮溶胀成凝胶1小时，用60mL去离子水分三次洗涤凝胶，静置5min后，移除清洗液；（2） 偶联：将氨基修饰的黄曲霉毒素B1适配体溶于1mL20.0mmol/LpH10.0的磷酸盐缓冲液中，将步骤（1）中溶胀凝胶悬浮于含适配体的缓冲液中，在37℃的水浴中振摇16小时，反应完后，再用3mL去离子水洗涤未反应的适配体，静置5min后，移除清洗液；（3）封闭：将步骤(2)中凝胶悬浮到2mL1mol/LpH8.0乙醇胺溶液中，在50℃的水浴中振摇4小时，反应完后，用3mL含0.5mol/LNaCl的0.1mol/LpH4.0乙酸缓冲液和3mL含0.5mol/LNaCl的pH8.3偶联缓冲液交替清洗，每次清洗2min，至少循环3次；（4）装柱：将步骤（3）的悬浮凝胶液移入固相萃取小柱，避免产生气泡，用5mL0.1mol/LpH8.0磷酸盐缓冲液平衡小柱。
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