[发明专利]一种大麦Waxy基因SNP突变的PCR-CTPP标记引物及方法

摘要

本发明公开了一种大麦Waxy基因SNP突变的PCR-CTPP标记引物，包括外引物G³⁹³⁵-TWF2和G³⁹³⁵-TWR2；内引物G³⁹³⁵-TNF2和G³⁹³⁵-TNR2；本发明还公开了一种大麦Waxy基因SNP突变的PCR-CTPP标记方法，包括以下步骤：采用CTAB法提取待检测植株基因组DNA；利用提取的DNA为模板进行特异性PCR扩增；将PCR扩增产物进行电泳，对基因型进行判定。本发明使用四个引物结合一次PCR和电泳，便能在大麦群体中快速且经济地筛选出携带G³⁹³⁵突变为T位点的糯大麦材料，并能作为一种追踪标记在大麦苗期提前对杂交分离群体进行鉴定，提高分子标记辅助选择育种效率。

主权项

一种大麦Waxy基因SNP突变的PCR‑CTPP标记引物，其特征在于，所述引物序列如下：外引物G³⁹³⁵‑TWF2的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，具体为：5’‑CGGGAAGAAGAAGTTTGAGA‑3’；外引物G³⁹³⁵‑TWR2的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示，具体为：5’‑CACTACAACAAGCGGCTATCT‑3’；内引物G³⁹³⁵‑TNF2的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示，具体为：5’‑TCGTGGAGGGCAAGATC‑3’；内引物G³⁹³⁵‑TNR2的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示，具体为：5’‑GCTGAGGCGGCCCATGTGGAATC‑3’，上述引物序列中带下划线的碱基为引入的错配碱基，加框的碱基为要检测的突变碱基。