[发明专利]一种快速灵敏的间日疟原虫检测方法有效
申请号: | 201410697136.2 | 申请日: | 2014-11-26 |
公开(公告)号: | CN104561269B | 公开(公告)日: | 2018-09-18 |
发明(设计)人: | 田桢干;张琳;岳巧云;张子龙;王俐;李美;汤林华;邱德义 | 申请(专利权)人: | 中华人民共和国上海出入境检验检疫局 |
主分类号: | C12Q1/6893 | 分类号: | C12Q1/6893;C12Q1/04;C12R1/90 |
代理公司: | 上海泰能知识产权代理事务所 31233 | 代理人: | 黄志达 |
地址: | 200135 上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明涉及一种快速、灵敏间日疟原虫的检测方法。本发明的检测方法整合了聚合酶链式反应PCR和微阵列这两种强大的分子生物学技术,把PCR杂交的探针直接固定在微阵列中的杂交舱中,与PCR反应室在同一张芯片上;检测方法包括:标本进行增菌处理,DNA液提取,PCR扩增,杂交,清洗,结果判读。本发明能对间日疟疟原虫进行快速灵敏的检测,通过本发明可大幅度提高进出口口岸一线检验检疫人员的检测效率,既可减少工作量、又可最大限度地解决传统检测方法可能存在的阳性漏检问题,从而最大限度地防止疟原虫疫情的发生。 | ||
搜索关键词: | 检测 疟原虫 灵敏 间日疟原虫 杂交 微阵列 分子生物学技术 聚合酶链式反应 传统检测 检验检疫 结果判读 直接固定 间日疟 漏检 探针 增菌 整合 工作量 清洗 芯片 进出口 口岸 标本 | ||
【主权项】:
1.用于快速灵敏检测间日疟原虫的引物和探针,其特征在于,所述引物和探针为三组:根据SSUrRNA基因设计的正反引物和探针为Pv1‑F:AGTTCGTGAATATGATTTGTC(SEQ ID NO 1)Pv1‑R:CTGCGCTTCTGTACTTGGC(SEQ ID NO 2)Probe:GGGGATTGCAATTATACTTCGTGTCG(SEQ ID NO 3)根据csp基因设计的正反引物和探针为Vp2‑F:GGTGAGAACCCAGATGACGAGG(SEQ ID NO 4)Vp2‑R:TGGACTCCATGCAGTGTAACCTGT(SEQ ID NO 5)Probe:GGTGATGGAGCAGCTGTACAG(SEQ ID NO 6)根据18SrRNA基因设计的正反引物和探针为Lm2‑F:GCAACGCTTCTAGCTTAATCCAC(SEQ ID NO 7)Lm2‑R:CAAGCCGAAGCAAAGAAAGTCC(SEQ ID NO 8)Probe:ACTTTGTGCGCATTTTGCTA(SEQ ID NO 9)。
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