[发明专利]一种重组表达谷氨酸特异性内肽酶的地衣芽孢杆菌及其构建方法在审
| 申请号： | 201410649790.6 | 申请日： | 2014-11-13 |
| 公开（公告）号： | CN104561075A | 公开（公告）日： | 2015-04-29 |
| 发明（设计）人： | 叶伟;章卫民;何欣;谭国慧 | 申请（专利权）人： | 广东省微生物研究所 |
| 主分类号： | C12N15/75 | 分类号： | C12N15/75;C12N1/21;C12R1/10 |
| 代理公司： | 广州科粤专利商标代理有限公司 44001 | 代理人： | 刘明星 |
| 地址： | 510070 *** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种重组表达谷氨酸特异性内肽酶的地衣芽孢杆菌及其构建方法。首先在谷氨酸特异性内肽酶基因的5’端连上p43启动子，在3’端连上终止子，再将此序列插入pHY300pLK克隆载体的EcoRI和HindIII酶切位点之中，然后转化到地衣芽孢杆菌中，得到重组表达谷氨酸特异性内肽酶的地衣芽孢杆菌。因此本发明选用适用于地衣芽孢杆菌的克隆载体PHY300PLK，并在其中引入P43启动子和终止子以便于GSE-BL的表达，实现地衣芽孢杆菌谷氨酸特异性内肽酶可溶性表达，为地衣芽孢杆菌谷氨酸特异性内肽酶的制备、研究其结构及酶学性质提供新的策略，从而促进GSE-BL在蛋白质序列及构象分析、多肽合成及生物活性肽的回收方面的广泛应用。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 重组 表达 谷氨酸 特异性 肽酶 地衣 芽孢 杆菌 及其 构建 方法 | ||
【主权项】：
一种重组表达谷氨酸特异性内肽酶的地衣芽孢杆菌的构建方法，其特征在于，首先在谷氨酸特异性内肽酶基因的5’端连上p43启动子，在3’端连上终止子，再将此序列插入pHY300pLK克隆载体的EcoRI和HindIII酶切位点之中，然后转化到地衣芽孢杆菌中，得到重组表达谷氨酸特异性内肽酶的地衣芽孢杆菌；所述的谷氨酸特异性内肽酶基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；所述的p43启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；所述的终止子的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。
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