[发明专利]一种快速确定牡丹花粉母细胞减数分裂时期的方法

摘要

本发明公开了一种快速确定牡丹花粉母细胞减数分裂时期的方法，主要步骤包括采样、固定、染色、压片及显微观察，该方法结合气温，根据花药颜色及花蕾直径的多重采样标准选取合适的花蕾，再进行染色压片，然后在显微镜下进行观察、确定牡丹花粉母细胞的减数分裂各时期。利用本发明的方法，取材固定后当天就可以观察检测花粉细胞的减数分裂情况，这不仅能节省时间、节约成本、提高实验效率，也能避免错过减数分裂期。

主权项

一种快速确定牡丹花粉母细胞减数分裂时期的方法，包括如下步骤，1)采样：在日平均气温为6.5～15.5℃时，选取花药颜色嫩黄，直径为12.10～16mm的花蕾；其中，所述花蕾为牡丹品种‘凤丹’的花蕾；2)固定：将步骤1)得到的花蕾去掉萼片花瓣，浸没在卡诺固定液中，做上标记；固定1～3小时后，用酒精清洗，并转移到酒精中于‑40～‑20℃保存备用；3)染色：取出步骤2)保存备用的花蕾，撕取雄蕊；吸去上面的酒精；在载玻片上滴一滴醋酸，将雄蕊置于载玻片上的醋酸中软化1～10秒，用解剖针切取一段1～6mm长的花药，滴加15～35μL卡宝品红，对花药上的染色体染色，用镊子夹碎样品，去掉残渣，得到样品；4)观察：将样品先在显微镜10～30倍镜下找到视野，再在显微镜40～100倍镜下观察处于分裂期的染色体。