[发明专利]一种小极性达玛烷型四环三萜配糖体的制备方法

摘要

本发明提供了一种小极性达玛烷型四环三萜配糖体的制备方法。其中，制备方法涉及蒸柜蒸制、超声波提取、高分子絮凝澄清、大孔吸附树脂柱层析、离子交换树脂柱层析、浓缩干燥等步骤。该方法与现有技术比较，其优点在于应用蒸柜蒸制技术进行高效环保炮制，应用超声波提取技术进行高效率与低能耗提取，应用高分子絮凝沉淀技术对大分子杂质进行处理，应用经典柱层析技术进行分离纯化。使用本发明提供的方法能实现小极性达玛烷型四环三萜配糖体的高效率、高质量、低成本和规模化生产。

主权项

一种小极性达玛烷型四环三萜配糖体的制备方法，其特征在于包括如下步骤：步骤（1），蒸柜蒸制：将富含大极性或中等极性达玛烷型四环三萜配糖体的植物原料粉碎，过10‑14mm筛，用纯化水以1:0.5‑1的料液质量比润制1‑2小时，放入蒸柜中以100‑120℃的温度蒸制10‑12小时，取出后干燥，得到制含小极性达玛烷型四环三萜配糖体的原料；步骤（2），超声波提取：将步骤（1）得到的富含小极性达玛烷型四环三萜配糖体的原料粉碎，过20‑40目筛后，用原料5‑10倍量质量浓度为70‑98%的乙醇超声提取3次，每次0.5‑2小时，过滤，提取液减压浓缩至无醇味，回收乙醇，得浓缩液；步骤（3），高分子絮凝澄清：将步骤（2）得到的浓缩液加水稀释1.5‑3倍，得到稀释液，将稀释液加热至70‑90℃，加入稀释液体积1‑3%的高分子絮凝剂液B组分，搅拌均匀，然后加入稀释液体积1‑3%高分子絮凝剂液A组分，搅拌均匀，再于60‑90℃下控温搅拌10‑40min，放置，冷却至室温，离心，上清液存入储罐，不溶物用水搅拌，过滤，滤液存入储罐；所述的高分子絮凝剂液A组分所使用的絮凝剂包括101果汁澄清剂、甲壳素、ZTC天然澄清剂、明胶、鞣酸或蛋清；所述的高分子絮凝剂液B组分所使用的絮凝剂包括101果汁澄清剂、甲壳素、ZTC天然澄清剂、明胶、鞣酸或蛋清；但高分子絮凝剂液A组分与高分子絮凝剂液B组分所使用的絮凝剂不相同；步骤（4），大孔吸附树脂柱层析：在层析柱中均匀装入大孔吸附树脂，树脂经预处理活化后，自顶部将步骤（3）储罐中的液体加入层析柱中，用水洗脱至洗脱液无色无味后，用质量浓度为70‑98%乙醇洗脱，每小时洗脱流量为柱体积的2‑8倍，用薄层层析检测，至洗脱液无达玛烷型四环三萜配糖体特征斑点，即停止洗脱，将乙醇洗脱液存入储罐；步骤（5），离子交换树脂柱层析：在层析柱中均匀装入离子交换树脂，树脂经预处理活化后，将步骤（4）得到的乙醇洗脱液自顶部泵入，用质量浓度为70‑98%乙醇洗脱，每小时洗脱流量为柱体积的2‑8倍，用薄层层析检测，至洗脱液无达玛烷型四环三萜配糖体特征斑点，即停止洗脱，收集洗脱液；步骤（6），浓缩干燥：将步骤（5）得到的洗脱液采用膜浓缩设备浓缩，喷雾干燥，即得到小极性达玛烷型四环三萜配糖体产品。