[发明专利]莱茵衣藻相关基因的RNAi载体及其构建方法和应用有效
| 申请号： | 201410591912.0 | 申请日： | 2014-10-29 |
| 公开（公告）号： | CN104388455B | 公开（公告）日： | 2018-01-16 |
| 发明（设计）人： | 陈利红;李丽丽;高利芬;周俊飞;李甜甜;彭海;张继;方治伟;章伟雄 | 申请（专利权）人： | 江汉大学 |
| 主分类号： | C12N15/65 | 分类号： | C12N15/65;C12N15/66;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 武汉开元知识产权代理有限公司42104 | 代理人： | 俞鸿 |
| 地址： | 430056 湖北省武*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种莱茵衣藻相关基因的RNAi载体及其构建方法和应用，所述RNAi载体含有一个莱茵衣藻嵌合组成型表达启动子HSP70A/RBCS2、内含子和3’UTR和潮霉素筛选标记表达框序列，莱茵衣藻嵌合组成型表达启动子HSP70A/RBCS2的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，3’UTR的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示，潮霉素筛选标记表达框序列的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示。本发明利用PCR技术把目的基因的部分cDNA片段先构建到中间载体pEASY‑T1上，然后再通过两次酶切相继把目标基因的正向和反向片段连接到莱茵衣藻RNAi骨架载体上，简化了载体构建步骤，缩短了载体构建时间，提高了效率，同时可以直接应用到衣藻其它基因的功能研究方面。 | ||
| 搜索关键词： | 莱茵衣藻 相关 基因 rnai 载体 及其 构建 方法 应用 | ||
【主权项】：
一种莱茵衣藻BBS1基因的RNAi载体在改变莱茵衣藻趋光性中的应用，其特征在于：所述RNAi载体含有一个莱茵衣藻嵌合组成型表达启动子HSP70A/RBCS2、BBS1基因正向片段、内含子、BBS1基因反向片段、3’UTR和潮霉素筛选标记表达框序列，其中，莱茵衣藻嵌合组成型表达启动子HSP70A/RBCS2的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，3’UTR的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示，潮霉素筛选标记表达框序列的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示；内含子为磷酸核酮糖激酶的第四段内含子，磷酸核酮糖激酶的第四段内含子的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示，BBS1基因的核苷酸序列如SEQ ID No.5所示。
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