[发明专利]一种副猪嗜血杆菌的二重PCR检测方法无效
| 申请号： | 201410572510.6 | 申请日： | 2014-10-23 |
| 公开（公告）号： | CN104293966A | 公开（公告）日： | 2015-01-21 |
| 发明（设计）人： | 朱建国;韩少鹏 | 申请（专利权）人： | 上海交通大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 上海新天专利代理有限公司 31213 | 代理人： | 张宁展 |
| 地址： | 200240 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明属于生物技术领域，具体为一种副猪嗜血杆菌的二重PCR检测方法。本发明以具有该病原体基因型特点的保守性16SrRNA基因，及其毒力因子编码基因vtaA基因，作为PCR检测的两个基因靶点，将扩增该2个基因片段的2对引物放在一个PCR反应体系，通过对退火温度、特异性等各项参数调整优化，建立直接从样品中一次检测副猪嗜血杆菌的二重PCR方法。本发明方法体系可用于检测具有呼吸道症状和(或)关节肿大的病猪肺组织和关节液的副猪嗜血杆菌，既可以准确检测病原体，还可以对其毒力因子编码基因结构变异进行分析，从而掌握其变异趋势，起到一箭双雕作用。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 嗜血 杆菌 二重 pcr 检测 方法 | ||
【主权项】：
一种副猪嗜血杆菌的二重PCR检测方法，其特征在于：以具有副猪嗜血杆菌基因型特点的保守性基因片段16SrRNA和毒力因子编码基因片段vtaA基因，作为PCR检测的两个基因靶点，将扩增这2个基因片段的2对引物放在一个PCR反应体系进行扩增，再通过琼脂糖凝胶电泳检测鉴定PCR扩增产物；其中：扩增16SrRNA基因的上游引物的序列如SEQ ID NO.1所示，下游引物的序列如SEQ ID NO.2所示；扩增vtaA基因的上游引物的序列如SEQ ID NO.3所示；下游引物的序列如SEQ ID NO.4所示。
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