[发明专利]一种肝素钠的制备方法

摘要

本发明提供一种肝素钠的制备方法，该制备方法包括粗品除杂、酶解、酸性除杂、氧化、冻干、粉碎，能够去除肝素钠中丝氨酸，克服了现有技术中肝素钠制备方法不适宜大批量生产的局限，具有工艺操作简单，提高肝素结构完整度和效价。

主权项

一种肝素钠的制备方法，其特征在于，该制备方法包括如下步骤：1)在25～35℃下，以20％(g/mL)浓度将粗品肝素钠溶解于纯化水中，以4～5％(g/mL)的浓度加入氯化钠，待溶解后调节pH至10.0～10.5，搅拌3.5～4.0小时，然后升温至80～85℃，调节pH至9.5～10.0，静置10分钟，迅速降温至20℃以下，静置4～5小时后过滤，取滤液；2)将步骤1得到的滤液升温至45～50℃，用18％(g/mL)的盐酸水溶液或20％(g/mL)的氢氧化钠水溶液调节pH至8.0～9.0，加入胰酶反应4～5小时，再以2％(g/mL)的浓度加入氯化钙，搅拌溶解后升温至80～85℃，继续搅拌10分钟，再降温至40℃以下，以2％(g/mL)的浓度加入碳酸钠，持续搅拌30分钟，离心，取上清液；3)向步骤2得到的上清液补加清水至步骤1中粗品肝素钠水溶液的初始体积，升温至45～50℃，用18％(g/mL)盐酸水溶液调节pH至4.5～5.5，加入纤维素酶搅拌下反应6～8小时，加入氯化钙，搅拌溶解，升温至80～85℃，搅拌10分钟，降温至40℃以下，以2％(g/mL)的浓度加入碳酸钠，持续搅拌30分钟，离心，取上清液；4)向步骤3得到的上清液加入95％(体积比)乙醇水溶液，搅拌均匀，降温至0～5℃，调节pH至1.0～2.0，离心，取上清液，迅速调节pH至6.0～7.0；5)向步骤4得到的上清液加入95％(体积比)乙醇水溶液至20℃下的乙醇浓度为40～45°，静置12～24小时，抽取上层乙醇，得湿沉淀；6)以30～35％(g/mL)的浓度将步骤5得到的湿沉淀溶解在纯化水中，加入25％(g/mL)的次氯酸水溶液，用18％(g/mL)的盐酸水溶液调节pH至4.5～5.0，20～30℃下静置6～8小时，调节pH至6.0～7.0，以1.5％(g/mL)的浓度加入氯化钠，搅拌溶解，加入95％(体积比)乙醇水溶液至20℃下的乙醇浓度为40～45°，静置6～8小时，抽去上层乙醇得到湿沉淀；7)以30～35％(g/mL)的浓度将步骤6得到的湿沉淀溶解在纯化水中，用20％(g/mL)的氢氧化钠水溶液调节pH至10.0～10.5，25～30℃下加入30％(g/mL)的过氧化氢水溶液，静置4小时，加入30％(g/mL)的过氧化氢水溶液，静置8小时，加入30％(g/mL)的过氧化氢水溶液，静置12小时，调节pH至6～7，过滤，得滤液；8)将上述步骤7的滤液冻干，粉碎。