[发明专利]老芒麦幼穗离体培养再生植株的方法

摘要

本发明主要涉及一种老芒麦幼穗离体培养植株再生技术，属于生物技术领域。一种老芒麦幼穗离体培养再生植株的方法，其主要特点在于包括以下步骤：1)外植体的获取；2)愈伤组织诱导；3)将诱导的愈伤组织接种于继代培养基中进行培养；4)将步骤3)的老芒麦愈伤组织转移至分化培养基中培养；5)待步骤4)的老芒麦愈伤组织有绿芽长出，将其转移至生根成苗培养基上进行培养；6)待有5条以上健壮根长出，将三角瓶上的封口膜去掉，同时加入5mL的蒸馏水，炼苗3d，然后将小植株从三角瓶中取出，洗净根部的培养基，最后移栽于混有草炭土和蛭石比例为1:1的花盆中，最初3d给幼苗遮上塑料薄膜以保持湿度。本发明为进行遗传转化和性状改良提供了研究平台。

主权项

一种老芒麦幼穗离体培养再生植株的方法，其特征在于包括以下步骤：1)外植体的获取：取处于雌雄蕊分化期、长度为3.0‑10cm的老芒麦幼穗，剪取植株上半部，去掉外层的叶片后在无菌条件下用棉球蘸取70％乙醇擦拭其茎秆和叶鞘，用消过毒的镊子剥取幼穗，将其切成2‑3mm的小段；2)愈伤组织诱导：将外植体接种于愈伤诱导培养基上，每皿接种10个幼穗小段，放入培养室培养，培养室温度为24‑26℃，光照时间16h/d，黑暗时间8h/d，培养时间为1‑2个月；3)将诱导的愈伤组织接种于继代培养基中进行培养，培养室温度为24‑26℃，光照时间16h/d，黑暗时间8h/d，培养天数为20‑30d；4)将步骤3)的老芒麦愈伤组织转移至分化培养基中培养，培养室温度为24‑26℃，光照时间16h/d，黑暗时间8h/d，培养天数为20‑30d；5)待步骤4)的老芒麦愈伤组织有绿芽长出，将其转移至生根成苗培养基上进行培养，培养室温度为24‑26℃，光照时间16h/d，黑暗时间8h/d；6)待有5条以上健壮根长出，将三角瓶上的封口膜去掉，同时加入5mL的蒸馏水，炼苗3d，然后将小植株从三角瓶中取出，洗净根部的培养基，最后移栽于混有草炭土和蛭石比例为1:1的花盆中，最初3d给幼苗遮上塑料薄膜以保持湿度。