[发明专利]一种荧光负染法检测活细胞的方法有效
| 申请号： | 201410515671.1 | 申请日： | 2014-09-29 |
| 公开（公告）号： | CN104345052B | 公开（公告）日： | 2017-10-20 |
| 发明（设计）人： | 何向锋;强福林;沈康;蔡晶;张一心;王建红;刘继斌 | 申请（专利权）人： | 南通市肿瘤医院 |
| 主分类号： | G01N21/64 | 分类号： | G01N21/64;G01N1/30 |
| 代理公司： | 苏州创元专利商标事务所有限公司32103 | 代理人： | 范晴 |
| 地址： | 江苏省南通市*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种荧光负染法检测活细胞的方法，荧光染色试剂将全细胞染色，细胞吞噬有不透光的纳米粒子颗粒时，纳米粒子颗粒富集于吞噬体内，由于纳米铁颗粒阻断了检测光线，使其在荧光图像上表现为荧光负染区，根据负染区的大小可方便判断出细胞对纳米粒子的吞噬率，而不影响细胞的活性。本发明细胞标记检测方法的CFSE荧光负染法可以用于纳米铁标记细胞后标记率与标记量的检测，用于评价纳米铁类新型药物的药效学与药代动力学分析，且本方法不需对细胞进行固定，CFSE染色简单方便，保持了细胞的活力。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 荧光 负染法 检测 细胞 方法 | ||
【主权项】：
一种荧光负染法检测小鼠巨噬细胞RAW264.7摄取SPIO的方法，包括以下步骤：(1)将不透光的超顺磁性氧化铁纳米粒子SPIO加入细胞悬液中，混合均匀，室温孵育进行标记；(2)在标记细胞溶液中，加入活细胞荧光染色试剂CFSE荧光染料进行染色，然后用PBS溶液洗涤2‑4次去上清，保留沉淀部分；(3)将前述沉淀部分的标记染色细胞在荧光显微镜或激光扫描共聚焦显微镜及其配套的活细胞工作站下进行检测。
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