[发明专利]一种定量RNaseH活性测定方法有效
| 申请号： | 201410502173.3 | 申请日： | 2014-09-28 |
| 公开（公告）号： | CN104293931B | 公开（公告）日： | 2017-01-18 |
| 发明（设计）人： | 徐晓昱;王静 | 申请（专利权）人： | 南京诺唯赞生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/44 |
| 代理公司： | 南京正联知识产权代理有限公司32243 | 代理人： | 王素琴 |
| 地址： | 210014 江苏省*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种定量RNaseH活性测定方法，所述方法包括如下步骤以一段RNA模板为底物，在DNA引物存在下，利用逆转录酶合成cDNA，形成DNA‑RNA杂合链；以该DNA‑RNA杂合链为底物，加入RNaseH酶，进行降解反应；降解反应后测定DNA单链或DNA‑RNA杂合链的相对量，由该测定结果推导出RNaseH酶的活性程度。该方法与现有技术方法相比，无放射性污染，操作简单便利，逆转录方法得到的DNA‑RNA杂合链可直接用于RNaseH的测活，不需要再经过酚氯仿抽题、乙醇沉淀等步骤，并且可以RNaseH活性进行定量的检测分析。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 定量 rnaseh 活性 测定 方法 | ||
【主权项】：
一种定量RNaseH活性测定方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：以一段RNA模板为底物，在DNA引物存在下，利用逆转录酶合成cDNA，形成DNA‑RNA杂合链；以该DNA‑RNA杂合链为底物，加入RNaseH酶，进行降解反应；降解反应后利用双链特异性荧光染料，通过荧光法测定DNA单链或DNA‑RNA杂合链的相对量，由该测定结果推导出RNaseH酶的活性程度，其中所用的双链特异性荧光染料是picogreen染料。
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