[发明专利]一种扩增游离DNA的方法在审
| 申请号： | 201410468186.3 | 申请日： | 2014-09-12 |
| 公开（公告）号： | CN104232619A | 公开（公告）日： | 2014-12-24 |
| 发明（设计）人： | 杨麒巍;张桂珍;杜珍武;宋旸;于杉 | 申请（专利权）人： | 吉林大学 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 长春吉大专利代理有限责任公司 22201 | 代理人： | 赵炳仁 |
| 地址： | 130012 吉*** | 国省代码： | 吉林;22 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种扩增游离DNA的方法，包括如下步骤：设计并合成两条寡核苷酸，寡核苷酸甲3’端为T碱基，从寡核苷酸甲3’端的第二个碱基与寡核苷酸乙5’端开始互补；将寡核苷酸乙5’端用磷酸根修饰；经退火反应得到接头DNA。另将游离DNA末端补平后经加A反应，得到有A粘性末端的游离DNA；以接头DNA和有A粘性末端的游离DNA进行连接反应得到的产物为模板，利用寡核苷酸甲为引物进行PCR扩增。本方法能够最大程度上保留DNA片段的完整性，防止游离DNA进一步片段化，利用该方法能够获得足以满足常规检测的游离DNA模板。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 扩增 游离 dna 方法 | ||
【主权项】：
一种扩增游离DNA的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)合成两条寡核苷酸，寡核苷酸甲3’端为T碱基，从寡核苷酸甲3’端的第二个碱基与寡核苷酸乙5’端开始互补；将寡核苷酸乙5’端用磷酸根修饰；经退火反应得到接头DNA；(2)将游离DNA末端补平后经加A反应，得到有A粘性末端的游离DNA；(3)将步骤(1)得到的接头DNA和步骤(2)得到的有A粘性末端的游离DNA进行连接反应，得到连接产物；(4)利用步骤(3)得到的连接产物为模板，步骤(1)中的寡核苷酸甲为引物进行PCR扩增。
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