[发明专利]一种刺桂愈伤组织和悬浮细胞的快速繁殖方法在审
| 申请号： | 201410463082.3 | 申请日： | 2014-09-12 |
| 公开（公告）号： | CN104263693A | 公开（公告）日： | 2015-01-07 |
| 发明（设计）人： | 杨存 | 申请（专利权）人： | 南京通泽农业科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/04 | 分类号： | C12N5/04;C12N5/02 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 210046 江苏省南京市*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种刺桂愈伤组织和悬浮细胞的快速繁殖方法，包括外植体的消毒、愈伤组织的诱导、愈伤组织的增殖、悬浮细胞的生长及调控。本发明的刺桂组培方法操作简单，细胞增殖率高，克服刺桂生长速度慢、自然繁殖率低等缺点，可以短期内获得大量的刺桂细胞，有助于刺桂药用成分的有效开发。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 刺桂愈伤 组织 悬浮 细胞 快速 繁殖 方法 | ||
【主权项】：
一种刺桂愈伤组织和悬浮细胞的快速繁殖方法，包括无菌胚的获得、愈伤组织的诱导、悬浮细胞培养等，主要步骤如下：（1）取刺桂幼嫩种胚和叶片，按照常规的消毒方法对其进行消毒；（2）将步骤（1）消毒处理过的刺桂幼嫩种胚和叶片切碎，以MS为基本培养基，添加2mg/L6‑BA+0.5mg/LNAA+30g/L蔗糖+6.5g/L琼脂，pH调至5.8，每瓶内盛30ml固体培养基；（3）取步骤（2）诱导出来的愈伤组织接入改良DKW、MS、DY等3种培养基进行增殖试验，添加2mg/L6‑BA+0.5mg/LNAA+30g/L蔗糖+6.5g/L琼脂，pH调到5.8，每个处理接种10瓶，每瓶接3块愈伤组织，重复3次；（4）取步骤（3）增殖出来的愈伤组织接入改良MS为基本培养基，添加不同浓度的稀土（硝酸镧），浓度梯度分别设为5、10、20mg/L，附加2‑3mg/L6‑BA+0.3‑0.5mg/LNAA，pH5.8，每个处理接种10瓶，每瓶接3块愈伤组织，重复3次，接种后分别在第5d、10d、15d测愈伤组织生长量，统计鲜重增量和增长率。
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