[发明专利]一种诱导人脐带间充质干细胞分化为胰岛β细胞的方法在审
| 申请号： | 201410453617.9 | 申请日： | 2014-09-05 |
| 公开（公告）号： | CN105462913A | 公开（公告）日： | 2016-04-06 |
| 发明（设计）人： | 胡祥;李陶;刘沐芸;李婵;丁长才 | 申请（专利权）人： | 深圳市北科生物科技有限公司;辽宁北科生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071 |
| 代理公司： | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人： | 唐致明 |
| 地址： | 518057 广东省深圳市南山区高新区北区北*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种利用转基因法诱导分化人脐带间充质干细胞获得胰岛β细胞的方法，使用包含PDX1、MAFA、NGN3、FOXA2、NEUROD1和FGF21胰岛细胞特异基因并连接穿膜信号的腺病毒表达载体，结合多种重组蛋白和小分子，诱导人脐带间充质干细胞定向分化为有功能的胰岛β细胞。本发明的诱导方法简便、易操作、分化效果好。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 诱导 脐带 间充质 干细胞 化为 胰岛 细胞 方法 | ||
【主权项】：
一种诱导人脐带间充质干细胞分化为胰岛β细胞的方法，其特征在于，包括以下步骤：1）将人脐带间充质干细胞在DMEM高糖培养基中培养，得到贴壁生长的人脐带间充质干细胞；2）用PBS清洗步骤1）中得到的人脐带间充质干细胞，然后用胰酶消化收集；3）将收集到的人脐带间充质干细胞用无血清的DMEM/F12培养基培养，同时添加六种腺病毒进行腺病毒感染，感染24小时后，用PBS清洗细胞，然后添加含有胎牛血清的DMEM高糖培养基培养，培养三天后，PBS清洗，再次进行腺病毒感染，如此循环，共进行三次腺病毒感染，完成人脐带间充质干细胞向胰岛β细胞的诱导分化；所述六种腺病毒的转染基因分别为PDX1、MAFA、NGN3、FOXA2、NEUROD1和FGF21。
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