[发明专利]一种制备1-异硫氰酸-4-甲磺酰基-(2-烯)丁烷的新方法

摘要

一种制备1-异硫氰酸-4-甲磺酰基-(2-烯)丁烷的新方法，具体涉及从萝卜籽或西兰花或油菜种子中提取萝卜硫素的方法。本发明以风干萝卜籽和西兰花种子或油菜籽为原料，经制备萝卜籽粉碎液、灭酶西兰花或油菜籽分散液、脱脂精磨液、发酵液、脱蛋白发酵液、浓缩液、多糖干粉、高纯度萝卜硫素冻干粉，制备出纯度高达98％以上的1-异硫氰酸-4-甲磺酰基-(2-烯)丁烷。本发明方法制备出的萝卜硫素生成率高、操作简单、产品纯度高达98％以上，绿色无污染等特点。采用本方法制备的产品可广泛应用于医药、保健品行业中，有防癌抗癌等功能。

主权项

一种制备1‑异硫氰酸‑4‑甲磺酰基‑(2‑烯)丁烷的新方法，其特征在于具体方法步骤如下：(1)、制备萝卜籽粉碎液分别取水分含量低于4％的风干萝卜籽，以萝卜籽质量∶冰水体积之比为1kg∶1～5L的比例，将风干萝卜籽分散于冰水中，在搅拌下放料于旋片式粉碎机中粉碎，粉碎完成后收集粉碎液，就得到萝卜籽粉碎液，用于制备脱脂精磨液；(2)、制备灭酶西兰花或油菜籽分散液取西兰花种子或油菜籽，先用中药粉碎机粉碎，再用20～60目的不锈钢筛网进行筛分，分别收集过筛物和未过筛物，对于未过筛的西兰花种子粉或油菜籽，返回破碎机进行再次破碎；对于过筛的西兰花种子粉或油菜籽，送入流化床干燥机中，通入温度为110～120℃、压力0.14～0.20Mpa的湿热水蒸汽，进行灭酶处理3～6min，灭酶处理完成后，按西兰花种子粉或油菜籽质量∶冰水体积之比为1kg∶1～4L的比例，将西兰花种子粉或油菜籽加入冰水中，搅拌使其分散，获得灭酶西兰花或油菜籽分散液，用于制备脱脂精磨液；(3)、制备脱脂精磨液按照萝卜籽粉碎液体积∶灭酶西兰花或油菜籽分散液体积之比为1L∶1.5～4.5L，将第1步和第2步制备出的萝卜籽粉碎液和灭酶西兰花或油菜籽分散液混合均匀后用胶体磨进行精磨，胶体磨定、转齿之间的间隙为60～150微米，精磨完成后收集精磨液，送入碟式分离机中，在6000～10000r/min的转速下进行脱脂分离，分别收集油脂层和脱脂层悬浊液，对收集的油脂层，送入油脂精炼车间进行精炼，制备食用油；对收集的脱脂悬浊液，即为脱脂精磨液，用于制备发酵液；(4)、制备发酵液将第3步制备出的脱脂精磨液送入发酵罐中，先用稀柠檬酸酸溶液调节pH值至4.5～5.5，再分别控制温度为25～35℃，搅拌速度为60～120r/min进行发酵处理1.5～4h，发酵处理完成后，将发酵物用160～250目的振动筛进行筛分分离，分别收集振动筛分过滤液和振动筛分滤渣，对于收集的滤渣，再进行真空压榨过滤，分别收集压榨过滤液和压榨滤渣，对收集的压榨过滤液，与收集的振动筛分过滤液合并，即为发酵液，用于制备脱蛋白发酵液；对收集的压榨滤渣，与第5步制备的离心沉淀混合后进行气流干燥，用作饲料添加剂；(5)、制备脱蛋白发酵液将第4步收集的发酵液送入沉淀罐中，用稀盐酸调节pH至3.5～4.0，静止放置10～30min后送入管式离心机，在12000～18000r/min的转速下进行离心分离，分别收集离心清夜和离心沉淀，对收集的离心清夜，即为脱蛋白发酵液，用于制备浓缩液；对于收集的离心沉淀，与第4步制备的压榨滤渣混合后进行气流干燥，用作饲料添加剂；(6)、制备浓缩液将第5步制备出的脱蛋白发酵液，泵入反渗透器中，在压力低于0.4MPa下进行反渗透浓缩，直至浓缩液中萝卜硫素的质量浓度达到20～30％时为止，分别收集反渗透截留液和滤过液，对于收集的反渗透截留液，即为萝卜硫素浓缩液，用于制备多糖干粉，对于收集的反渗透滤过液，进行生化处理，达标后排放；(7)、制备多糖干粉将第6步制备出的萝卜硫素浓缩液搅拌分散于多糖粉中，如食品级支链淀粉、精制魔芋粉、玉米淀粉，萝卜硫素浓缩液体积∶多糖质量之比为1L∶2～5kg，搅拌均匀后在低温下真空干燥，控制干燥温度为35～45℃，干燥时间为10～15h，收集干燥后的萝卜硫素多糖干粉，用于下步制备高纯度萝卜硫素冻干粉；(8)、制备高纯度萝卜硫素冻干粉将第7步制备出的萝卜硫素多糖干粉置于溶解罐中，加入无水甲醇，搅拌处理20～30min后过滤，收集滤过液进行真空浓缩，控制真空度为0.07～0.09Mpa，温度35～45℃，浓缩成膏状，浓缩完成后，再用甲醇浓度为3～6％的冰水将膏状物溶解，膏状物质量∶冰水体积之比为1kg∶5～10L，得到萝卜硫素冰水溶解液；将萝卜硫素冰水溶解液泵入以反相C18硅胶为填料的制备型液相色谱柱中，萝卜硫素冰水溶解液体积∶C18硅胶填料质量之比为1L∶50～80kg，控制条件分离萝卜硫素，具体的色谱条件为：检测波长为245nm，柱温为25℃，流速为700.0mL·min‑1；A组分为甲醇，B组分为超纯水；梯度洗脱程序为：在0min～15min区间，流动相中的A组分由5％上升至25％，B组分由95％下降至75％；在15min～75min区间，流动相中的A组分由25％上升至65％，B组分由75％下降至35％，收集37～41min区间的洗脱液，在35～45℃下进行真空浓缩，直至浓缩液中萝卜硫素质量浓度达到30～50％时，就制备出萝卜硫素浓缩液，收集的甲醇回收液进行再次蒸馏回收甲醇；将该萝卜硫素浓缩液置于冷冻干燥机中，在25～45Pa真空度、‑50～‑60℃温度下，进行冷冻干燥24～36h，就制备出纯度为98％以上的萝卜硫素冻干粉，经核磁共振、液质联机和旋光仪分析鉴定，所制备出的萝卜硫素的化学结构为1‑异硫氰酸‑4‑甲磺酰基‑(2‑烯)丁烷。