[发明专利]一种苯丙氨酸手性色谱柱固定相的制备方法

摘要

本发明提供一种基于苯丙氨酸的手性色谱柱固定相的制备方法，所述制备方法包括以下步骤第一步，硅胶球表面处理；第二步，苯丙氨酸手性选择器单体的制备；第三步，手性色谱柱固定相的制备。本发明方法具有的有益效果是1)工艺路线简单、成本低廉、操作方便；2)制备的手性色谱柱固定相具有较宽的手性选择性；3)流动相适用范围广，固定相结合力好，不易流失，使用寿命长；4)分离时间短，不拖尾，柱效高等。

主权项

一种苯丙氨酸手性色谱柱固定相的制备方法，其特征是：所述制备方法包括以下步骤，1)载体硅胶球的前处理：取5.0g硅胶球加入茄形瓶，再加入10mL的12mol/L的浓盐酸，加热回流1～24h；过滤除去浓盐酸，水洗硅胶球至呈中性，依次用丙酮和无水乙醚冲洗，真空干燥；2)苯丙氨酸手性单体的制备：(1)Z‑苯丙氨酸的合成：冰水浴下在装有1.0L去离子水的三颈瓶中依次加入0.1～10mol氢氧化钠，0.1～10mol苯丙氨酸，搅拌全溶后，向溶液中滴加含有0.1～10mol苄氧酰氯和0.1～10mol氢氧化钠的1.0L去离子水溶液，室温下搅拌5～20h；用乙醚萃取，在萃取出的水相中加入浓盐酸，至水相呈酸性，加入乙酸乙酯萃取，水洗至呈中性，分出的有机相用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发除去乙酸乙酯，滤去硫酸钠；之后用四氯化碳及石油醚重结晶，干燥后即得Z‑苯丙氨酸；(2)Z‑苯丙氨酸‑芳香胺的反应：称取0.1～10mol由步骤(1)制得的Z‑苯丙氨酸加入三颈瓶中，再加入50～1000mL N，N‑二甲基甲酰胺，加热搅拌溶解，再加入0.1～10mol苯并三氮唑‑N，N，N′，N′‑四甲基脲六氟磷酸酯，搅拌1～5h后加入0.1～10mol三乙胺，称取0.1～10mol芳香胺溶解于50～500mLN，N‑二甲基甲酰胺中加入到混合液中，常温搅拌1～10h，45℃下搅拌1～50h，然后向三颈瓶中加入去离子水析出沉淀，过滤，滤饼真空干燥，用乙醇重结晶，抽滤，真空干燥；(3)脱去苄氧基保护：向250mL的三颈瓶中加入0.1～10mol步骤(2)产物，加入乙醇溶解，加入少量用乙醇稀释的钯碳，通入氢气反应，当溶液冷却后没有固体析出时，停止反应，抽滤除去钯碳，滤液浓缩干后，用四氢呋喃和石油醚重结晶；(4)与Z‑苯丙氨酸反应：称取0.1～10mol的Z‑苯丙氨酸在三颈瓶中，加入50～1000mL的N，N‑二甲基甲酰胺加热搅拌溶解，加入0.1～10mol苯并三氮唑‑N，N，N′，N′‑四甲基脲六氟磷酸酯，搅拌1～5h后加入0.1～10mol的三乙胺，称取0.1～10mol的步骤(3)产物溶解于50～500mL N，N‑二甲基甲酰胺中加入到混合液中，常温下搅拌1～10h，45℃下搅拌1～50h，然后向三颈瓶中加入去离子水析出沉淀，过滤，滤饼真空干燥，用四氢呋喃重结晶，抽滤，真空干燥；(5)Z‑苯丙氨酸二肽衍生物的合成：向250mL的三颈瓶中加入0.1～10mol步骤(4)产物，加入四氢呋喃溶解，加入少量用四氢呋喃稀释的钯碳，通入氢气反应，当溶液冷却后没有固体析出时，停止反应，抽滤除去钯碳，滤液浓缩干后，用四氢呋喃，和石油醚重结晶；(6)手性单体的合成：氮气保护下向反应瓶中加入0.1mol～10mol步骤(5)产物，然后加入10～1000mL二氯甲烷，搅拌溶解，再加入用二氯甲烷稀释的0.1～10mol异氰酸酯基硅氧烷，室温反应10‑24h，在氮气保护下滤去滤液，滤饼分别用50‑500mL重蒸的二氯甲烷，石油醚洗涤，即得手性单体；3)手性固定相的制备：取1～500mg在步骤2)中制得的手性单体加入茄形瓶中，然后加入在步骤1)中制得的经过前处理载体硅胶球和适量甲苯，加热回流，用分水器除水1～100h后过滤，依次用丙酮、乙醚冲洗滤出的固体，真空干燥，即得该苯丙氨酸手性色谱柱固定相。